| 查看: 1653 | 回复: 3 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
marcosun木虫 (正式写手)
|
[求助]
求助cell based ELISA的方法和应用
|
||
|
学化学的，突然要考生物。简答cell based ELISA的方法和应用。。。 求大神 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有87人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 小鼠ELISA和流式细胞实验问题求助
已经有8人回复
- 微谱求助，谢谢各位大神
已经有3人回复
- 求助酶联免疫的问题
已经有8人回复
- ELISA问题求助
已经有6人回复
- ELISA方法的准确性
已经有18人回复
- 诺华上海研发中心招聘
已经有22人回复
- 关于Elisa和Elisa kit的区别
已经有4人回复
- 求助如何把一个cell的值赋给相同x值的cell单元内
已经有5人回复
- 【资料】细胞培养、电泳、ELISA、基因破碎、酵母等__invitrogen公司的实验手册
已经有157人回复
- 武汉友芝友生物制药有限公司求生物科研人才
已经有32人回复
zhang881007
金虫 (小有名气)
- 应助: 168 (高中生)
- 金币: 571.4
- 红花: 6
- 帖子: 236
- 在线: 81.1小时
- 虫号: 1300123
- 注册: 2011-05-19
- 专业: 生物化学
2楼2013-01-04 15:42:53
sunxiang1221
新虫 (初入文坛)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 530.5
- 帖子: 11
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 1629227
- 注册: 2012-02-20
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
marcosun: 回帖置顶 2013-01-06 10:10:42
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 热心，专业 2013-01-06 11:29:05
marcosun: 金币+5 2013-01-07 00:06:02
marcosun: 回帖置顶 2013-01-06 10:10:42
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 热心，专业 2013-01-06 11:29:05
marcosun: 金币+5 2013-01-07 00:06:02
|
cell ELISA（酶联免疫吸附试验）是用细胞代替可溶性抗原包被于96 孔酶联板（或细胞培养板）进行免疫学检测的一种有效方法，该方法特别适用于抗原位于细胞膜上而相应抗原的特性又不十分清楚或抗原难于纯化等情况。 1、原理： ELISA的原理是使第一抗体结合到某种固相载体表面，同时用酶标记第二抗体，在测定时，把受检标本、固相载体抗体和酶标二抗按不同的步骤与起反应，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例，加入酶反应底物，底物被酶催化生色且与受检标本量相关，以此定性定量。 Cell ELISA的原理是用细胞代替了固相载体和受检可溶性抗原，基于ELISA原理测定细胞表面特定的分子。而今年以此衍生出多种模式的细胞-ELISA。 2、与普通ELISA区别： 普通ELISA CELL ELISA 包被物质 可溶性抗原（或抗体） 受检的细胞悬液 常用标记酶 HRP、ALP β-gal 目的 检测可溶性抗原、抗体 测定细胞表面表达的特定分子、评定细胞功能 3、基本步骤为：制备受检细胞悬液-----将其置于96孔板小孔内------加第一抗体------温育洗涤后-----加第二抗体-----温育洗涤----加底物液------显色------判断结果。 4、要点：细胞包被和96孔板洗涤，抗体选择，标记酶的选择，抗体-酶结合复合物的制备 5、优点 用以检测粘附细胞表面抗原优于流式细胞仪，可测定粘附细胞表达的任何表面分子，还可检测非粘附细胞。快速、方便、敏感性很高、可大量测定细胞表面分子表达。 6、应用 主要用于测定细胞表面特定的分子。 ①疾病的诊断和鉴别诊断：如采用cell ELISA鉴别结核性脑膜炎（TBM）和经不完全治疗后的化脓性脑膜炎（PTPM），利用的是TBM患者脑脊液中存在一种30000蛋白抗原，可以被B淋巴细胞可以对此蛋白产生应答，PTPM则无此类反应。 ②药物疗效的考核：用细胞ELISA研究pravastatin对内皮细胞活化的作用；用细胞ELISA和逆转录酶联反应观察ICAM-1的表达以探讨药物ISA的作用；ELISA测定糖皮质激素地塞米松作用后内皮细胞产生血管细胞粘附分子(VCAM-1)和ICAM-1的水平。 ③发病机制的研究：全细胞细菌-ELISA测定COPD患者的抗H.influenzae抗体，研究COPD加剧与对influenzae应答的关系。 ④方法学比较 希望对你有用！ |
3楼2013-01-06 09:36:43
sunxiang1221
新虫 (初入文坛)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 530.5
- 帖子: 11
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 1629227
- 注册: 2012-02-20
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
|
cell ELISA（酶联免疫吸附试验）是用细胞代替可溶性抗原包被于96 孔酶联板（或细胞培养板）进行免疫学检测的一种有效方法，该方法特别适用于抗原位于细胞膜上而相应抗原的特性又不十分清楚或抗原难于纯化等情况。 1、原理： ELISA的原理是使第一抗体结合到某种固相载体表面，同时用酶标记第二抗体，在测定时，把受检标本、固相载体抗体和酶标二抗按不同的步骤与起反应，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例，加入酶反应底物，底物被酶催化生色且与受检标本量相关，以此定性定量。 Cell ELISA的原理是用细胞代替了固相载体和受检可溶性抗原，基于ELISA原理测定细胞表面特定的分子。而今年以此衍生出多种模式的细胞-ELISA。 2、与普通ELISA区别： 普通ELISA CELL ELISA 包被物质 可溶性抗原（或抗体） 受检的细胞悬液 常用标记酶 HRP、ALP β-gal 目的 检测可溶性抗原、抗体 测定细胞表面表达的特定分子、评定细胞功能 3、基本步骤为：制备受检细胞悬液-----将其置于96孔板小孔内------加第一抗体------温育洗涤后-----加第二抗体-----温育洗涤----加底物液------显色------判断结果。 4、要点：细胞包被和96孔板洗涤，抗体选择，标记酶的选择，抗体-酶结合复合物的制备 5、优点 用以检测粘附细胞表面抗原优于流式细胞仪，可测定粘附细胞表达的任何表面分子，还可检测非粘附细胞。快速、方便、敏感性很高、可大量测定细胞表面分子表达。 6、应用 主要用于测定细胞表面特定的分子。 ①疾病的诊断和鉴别诊断：如采用cell ELISA鉴别结核性脑膜炎（TBM）和经不完全治疗后的化脓性脑膜炎（PTPM），利用的是TBM患者脑脊液中存在一种30000蛋白抗原，可以被B淋巴细胞可以对此蛋白产生应答，PTPM则无此类反应。 ②药物疗效的考核：用细胞ELISA研究pravastatin对内皮细胞活化的作用；用细胞ELISA和逆转录酶联反应观察ICAM-1的表达以探讨药物ISA的作用；ELISA测定糖皮质激素地塞米松作用后内皮细胞产生血管细胞粘附分子(VCAM-1)和ICAM-1的水平。 ③发病机制的研究：全细胞细菌-ELISA测定COPD患者的抗H.influenzae抗体，研究COPD加剧与对influenzae应答的关系。 ④方法学比较 |
4楼2013-01-06 09:45:11
28