应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 生物素标记葡萄糖氧化酶
241/3返回列表123下一页
查看: 1440  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

[求助] 生物素标记葡萄糖氧化酶

老板让我标记葡萄糖氧化酶，我生物素标记抗体，效果很好，但不知道为什么一标记葡萄糖氧化酶，酶就失活了，怎么办啊？
还有，刚标记好直接用没问题，但是一放在-20度冰箱，酶就不行了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-03 16:58:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的标记量是多少，是一份子酶一份子生物素么
赞一下 回复此楼
shine
2楼2013-01-04 16:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-04 16:01:10
你的标记量是多少，是一份子酶一份子生物素么

不是，是按照分子量1比20标记的
我现在想知道怎么能够去除未标记的生物素啊？
透析几次可以啊？
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-04 16:47:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)
★
wizardfan: 金币+1, 鼓励发帖交流 2013-02-17 09:38:45
我想求助下这位虫友，你生物素标记抗体时怎么标记的？  能否告诉下流程， 最近做了一个生物素标记，标记完后，结果抗体变性了。检测有非特异性反应。 悲剧的很啊
赞一下 回复此楼
4楼2013-02-16 11:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

能告知在下的话。 不甚感激。
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-16 11:33:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

出去未标记的生物素，直接透析或者用G-25柱过柱即可。
赞一下 回复此楼
6楼2013-02-17 17:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-02-17 17:24:12
出去未标记的生物素，直接透析或者用G-25柱过柱即可。

已经经过透析处理了。 透析了1天1液，换透析液5次....难道还透析不干净么？
赞一下 回复此楼
7楼2013-02-18 08:29:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by royhahaha at 2013-02-18 08:29:41
已经经过透析处理了。 透析了1天1液，换透析液5次....难道还透析不干净么？...

恩，应该差不多了，你透析的时候有没有将透析桶放在磁力搅拌器上搅拌透析？这样可以加快液体之间的交换，加上换液，透析效果会好点。
赞一下 回复此楼
8楼2013-02-18 08:44:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-02-18 08:44:27
恩，应该差不多了，你透析的时候有没有将透析桶放在磁力搅拌器上搅拌透析？这样可以加快液体之间的交换，加上换液，透析效果会好点。...

是的， 一直磁力搅拌的。
赞一下 回复此楼
9楼2013-02-19 08:33:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-02-18 08:44:27
恩，应该差不多了，你透析的时候有没有将透析桶放在磁力搅拌器上搅拌透析？这样可以加快液体之间的交换，加上换液，透析效果会好点。...

我最后做出来的结果是我所标记的抗体发生非特异性反应了。
不知道因为溶NHS-Biotin用的是DMSO（150微升），最后总的标记混合液体积是5ml左右的缓冲液。
不知道虫友知道为什么是什么导致抗体变性的么？（我的抗体是单抗）
赞一下 回复此楼
10楼2013-02-19 08:36:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小小乖宝宝 的主题更新
241/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程（专）一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +8 吃吃吃才有意义 2026-03-19 8/400 2026-03-21 00:49 by 刘国森
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 Mqqqqqq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:46 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 求调剂 +3 暗涌afhb 2026-03-16 3/150 2026-03-20 00:28 by 河南大学校友
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭