24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1464  |  回复: 23

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

[求助] 生物素标记葡萄糖氧化酶

老板让我标记葡萄糖氧化酶,我生物素标记抗体,效果很好,但不知道为什么一标记葡萄糖氧化酶,酶就失活了,怎么办啊?
还有,刚标记好直接用没问题,但是一放在-20度冰箱,酶就不行了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的标记量是多少,是一份子酶一份子生物素么
shine
2楼2013-01-04 16:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-04 16:01:10
你的标记量是多少,是一份子酶一份子生物素么

不是,是按照分子量1比20标记的
我现在想知道怎么能够去除未标记的生物素啊?
透析几次可以啊?
3楼2013-01-04 16:47:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)


wizardfan: 金币+1, 鼓励发帖交流 2013-02-17 09:38:45
我想求助下这位虫友,你生物素标记抗体时怎么标记的?  能否告诉下流程, 最近做了一个生物素标记,标记完后,结果抗体变性了。检测有非特异性反应。 悲剧的很啊
4楼2013-02-16 11:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

能告知在下的话。 不甚感激。
5楼2013-02-16 11:33:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

出去未标记的生物素,直接透析或者用G-25柱过柱即可。
6楼2013-02-17 17:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-02-17 17:24:12
出去未标记的生物素,直接透析或者用G-25柱过柱即可。

已经经过透析处理了。 透析了1天1液,换透析液5次....难道还透析不干净么?
7楼2013-02-18 08:29:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by royhahaha at 2013-02-18 08:29:41
已经经过透析处理了。 透析了1天1液,换透析液5次....难道还透析不干净么?...

恩,应该差不多了,你透析的时候有没有将透析桶放在磁力搅拌器上搅拌透析?这样可以加快液体之间的交换,加上换液,透析效果会好点。
8楼2013-02-18 08:44:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-02-18 08:44:27
恩,应该差不多了,你透析的时候有没有将透析桶放在磁力搅拌器上搅拌透析?这样可以加快液体之间的交换,加上换液,透析效果会好点。...

是的, 一直磁力搅拌的。
9楼2013-02-19 08:33:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-02-18 08:44:27
恩,应该差不多了,你透析的时候有没有将透析桶放在磁力搅拌器上搅拌透析?这样可以加快液体之间的交换,加上换液,透析效果会好点。...

我最后做出来的结果是我所标记的抗体发生非特异性反应了。
不知道因为溶NHS-Biotin用的是DMSO(150微升),最后总的标记混合液体积是5ml左右的缓冲液。
不知道虫友知道为什么是什么导致抗体变性的么?(我的抗体是单抗)
10楼2013-02-19 08:36:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小小乖宝宝 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕322分 +12 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 12/600 2026-04-08 11:43 by 1753564080
[考研] 求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分 +15 多多爱吃汉堡 2026-04-04 16/800 2026-04-08 11:39 by i_cooler
[考研] 0703化学调剂325分 +13 15771691647 2026-04-04 14/700 2026-04-08 10:28 by screening
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
[考研] 071000生物学,一志愿深圳大学296分,求调剂 +12 TIckLw 2026-04-06 13/650 2026-04-07 20:34 by lijunpoly
[考研] 085600材料与化工301分求调剂院校 +25 刺痛jk 2026-04-06 26/1300 2026-04-07 15:07 by -迷了路啊路
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 信工所11408 340分 本科西安交大自动化 +3 moontrek 2026-04-06 3/150 2026-04-07 09:56 by chongya
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
[考研] 285求调剂 +15 哦呦呼o 2026-04-04 17/850 2026-04-06 23:02 by chenzhimin
[考研] 0855求调剂材料 +11 红桃灼灼 2026-04-04 12/600 2026-04-06 10:26 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +12 lyz0427 2026-04-03 12/600 2026-04-06 06:37 by houyaoxu
[考研] 085600调剂 +9 东照照照 2026-04-04 9/450 2026-04-05 13:44 by ujn_zhuj
[考研] 一志愿上海大学生物学346 +3 上海大学346调剂 2026-04-03 3/150 2026-04-04 20:20 by dongzh2009
[考研] 调剂 +9 19945159693 2026-04-03 10/500 2026-04-04 20:16 by dongzh2009
[考研] 怎么删帖子啊 +3 缝曦1000 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:20 by 土木硕士招生
[考研] 297求调剂 +11 ljy20040718! 2026-04-03 13/650 2026-04-04 09:23 by 来看流星雨10
[考研] 建环,能源,土木老师路过看一看!!! +5 嘿嘿uu 2026-04-01 5/250 2026-04-03 11:47 by znian
[考研] 生物学硕341求调剂 +4 你笑起来像云朵 2026-04-03 4/200 2026-04-03 10:32 by macy2011
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-04-02 3/150 2026-04-03 08:44 by yulian1987
信息提示
请填处理意见