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至尊木虫 (著名写手)

[求助] 镍柱纯化蛋白PAG电泳杂带多并且纯化带膨大

如图，请问各位大侠什么原因

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2012-12-27 10:33:18, 173.38 K

huxi

1楼 2012-12-27 10:34:26

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新虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-27 17:00:46

杂带多，是正常的，Ni填料本身其特异性就不是很强，有非特异性吸附。
目的蛋白膨大是因为你目的蛋白富集，浓度高，在电泳自然是那种现象。可以稀释一下，再电泳。
你电泳时，目的蛋白的浓度大约是多少？太高了，杂蛋白自然也浓度高。

2楼2012-12-27 10:50:31

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至尊木虫 (著名写手)

但听说已毕业的师兄做出的纯化，电泳带都比较单一。纯化后目的蛋白浓度也不是很高，如果稀释了目的条带可能看不清楚。

huxi

3楼2012-12-27 16:28:41

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