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jozsh新虫 (小有名气)
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[求助]
组织和细胞中,膜蛋白,胞浆蛋白,核蛋白提取裂解液区别
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组织和细胞中,膜蛋白,胞浆蛋白,核蛋白提取裂解液区别 有人说提取膜蛋白要加2M还是7M的尿素,但是具体要加多少呢????求配方啊!!!!!!!!!!核蛋白又怎么提取呢???? |
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3楼2012-12-27 10:56:48
zx1984
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 7569.2
- 散金: 2765
- 红花: 2
- 帖子: 434
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- 虫号: 1176692
- 注册: 2010-12-24
- 性别: GG
- 专业: 出血、凝血与血栓
2楼2012-12-27 09:54:55
【答案】应助回帖
| 无意间发现这个,希望对楼主有用:取各组股四头肌样品2 g,置入20%匀浆液(250 mmol/L蔗糖,10 mmol/L碳酸氢钠,5 mmol/L叠氮钠),匀浆后离心(1200 g)10 min,留上清液,190000 g离心1 h,制备蔗糖梯度(25%、30%、35%),150000 g离心2 h,细胞膜成分从25%蔗糖的上半层收集,细胞内膜成分为30%和35%蔗糖层交界处收集,以10 mmol/L碳酸氢钠,5 mmol/L叠氮钠溶液稀释各膜成分,190000 g离心1 h,以250 mmol/L蔗糖、50 mmol/L Tris (pH 7.4)溶液悬浮沉淀,所有过程在4℃进行。这样的话,是不是细胞膜就可以提取其蛋白质了? |
4楼2012-12-27 11:02:15
5楼2013-11-14 15:32:22













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