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jozsh新虫 (小有名气)
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[求助]
组织和细胞中，膜蛋白，胞浆蛋白，核蛋白提取裂解液区别
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组织和细胞中，膜蛋白，胞浆蛋白，核蛋白提取裂解液区别 有人说提取膜蛋白要加2M还是7M的尿素，但是具体要加多少呢？？？？求配方啊！！！！！！！！！！核蛋白又怎么提取呢？？？？ |
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3楼2012-12-27 10:56:48
【答案】应助回帖
| 无意间发现这个，希望对楼主有用：取各组股四头肌样品2 g，置入20%匀浆液（250 mmol/L蔗糖，10 mmol/L碳酸氢钠，5 mmol/L叠氮钠），匀浆后离心（1200 g）10 min，留上清液，190000 g离心1 h，制备蔗糖梯度（25%、30%、35%），150000 g离心2 h，细胞膜成分从25%蔗糖的上半层收集，细胞内膜成分为30%和35%蔗糖层交界处收集，以10 mmol/L碳酸氢钠，5 mmol/L叠氮钠溶液稀释各膜成分，190000 g离心1 h，以250 mmol/L蔗糖、50 mmol/L Tris （pH 7.4）溶液悬浮沉淀，所有过程在4℃进行。这样的话，是不是细胞膜就可以提取其蛋白质了？ |
4楼2012-12-27 11:02:15