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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教使用gel red 染料的同学们，你们使用的琼脂糖都是什么品牌什么型号的？
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
EMD OmniPur® Agarose
跑胶没任何问题
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31楼2013-02-22 23:28:05
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sdhjw2013

新虫 (初入文坛)
GelRed做预制胶跑出的胶图就是这样的，不是琼脂糖及GelRed质量问题。GelRed做染料最好是和样品混合后，上样到没加任何染料的琼脂糖凝胶中。既可以避免过多浪费染料，条带效果与EB，GoldView等染料相比也要更好。给一个GelRed与样品混合上样效果胶图

酶切GR图--.JPG
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32楼2013-02-23 09:26:15
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
32楼: Originally posted by sdhjw2013 at 2013-02-23 09:26:15
GelRed做预制胶跑出的胶图就是这样的，不是琼脂糖及GelRed质量问题。GelRed做染料最好是和样品混合后，上样到没加任何染料的琼脂糖凝胶中。既可以避免过多浪费染料，条带效果与EB，GoldView等染料相比也要更好。给一 ...

你们是在什么公司买的 gelred
另外问问  gelred 染液的 颜色呈鲜红还是暗红。。。
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33楼2013-02-23 09:54:15
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sdhjw2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
33楼: Originally posted by 老夏853 at 2013-02-23 09:54:15
你们是在什么公司买的 gelred
另外问问  gelred 染液的 颜色呈鲜红还是暗红。。。...

上海开放生物买的，gelred 原装染液是暗红的。曾经买过偏鲜红gelred （忘记是不是也在上海开放生物买了），后来使用发现有掺假成分，不过给退货了。
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34楼2013-02-24 10:48:12
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26264716

铁虫 (小有名气)
Biowest，做胶的时候加进去，一定要把胶充分打热，说明书上写的是可以加进去再打热，但是我都是把胶打好后再加，我加四万分之一都能染出很好的效果。。。
后染的话染色时间要长，我通常染半小时。。
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苦，才是人生
35楼2013-02-24 14:04:15
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
我31楼放的图就是预制较用gel red的 1:20000
就在biotium买的没任何问题
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36楼2013-02-24 22:33:39
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phuanhuan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
31楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-02-22 23:28:05
EMD OmniPur® Agarose
跑胶没任何问题

这效果非常好啊，我同学跑出来的还行，条带拖尾比较严重。之前找过开放生物咨询，他们说是浓度太大，建议稀释更多使用，但是说明书上说的是10000倍稀释使用的。
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37楼2013-02-25 13:15:38
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yuqianswim

银虫 (小有名气)
我最近用SYBR@gold跑胶和楼主的一模一样，之前还一直怀疑是不是我买的胶的问题，看到楼主的帖子才发现不是agrose的问题（咱们的两个的agrose不同，染料也不同，但是之前做的时候都挺好的，我唯一不同的是之前用的是EB，现在换成了SYBR），于是我就像是不是染料的问题，果真如此：今天晚上又跑了一次，这次是后染，发现这种微笑或是波浪形的问题就没有了，就是因为SYBR是大分子，如果过和核酸结合后是会影响电泳的迁移率的，所以对于大分子的染料最好是后染，不过我下一步会试试稀释足够的倍数是不是可以再制备胶的时候加进去。
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38楼2015-01-19 20:49:35
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
38楼: Originally posted by yuqianswim at 2015-01-19 20:49:35
我最近用SYBR@gold跑胶和楼主的一模一样，之前还一直怀疑是不是我买的胶的问题，看到楼主的帖子才发现不是agrose的问题（咱们的两个的agrose不同，染料也不同，但是之前做的时候都挺好的，我唯一不同的是之前用的是 ...

是的  
后来我也想明白了。染料能和DNA结合 必定带相反电荷 在 电泳的时候也会向着反方向移动。 安全的染料号称是大分子 不能透过细胞膜 那么 带的电荷大到一定程度就会影响核酸片段的迁移 造成条带弯曲。。。。

市售的  gelred 有真有假。 真的是大分子  电泳条带弯曲。 假的是EB 勾兑的  条带没问题。。。
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39楼2015-01-20 10:01:43
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wanglixia815

新虫 (正式写手)
你好，看到你的帖子，我最近遇到了和你一样的问题，用gelred总是拖尾，你解决了吗问题？样品和gelred混合的时候要加多少啊？我的是1比10000的gelred[/quote]
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有点矛盾。有点纠结
40楼2016-01-05 20:59:03
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