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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 请教使用gel red 染料的同学们,你们使用的琼脂糖都是什么品牌什么型号的?

求助!!!
实验室换了安全燃料 gelred,但是跑出的条带不是弯曲的笑脸型就是 w型的。燃料美国总部建议使用纯度更好的琼脂糖,一时也不知道该用什么。
所以 在此发问,有没有哪位同学同样使用gelred 的,电泳条带没有问题的
你们使用的琼脂糖的品牌、型号。能帮忙起身去看看货号更好!谢谢各位了、

顺便,如果有同学觉得问题不在琼脂糖,也可以指出来。。。


120V 20 min,缓冲液 1x TAE,  TAKARA 的loading buffer 6X ,琼脂糖是西班牙进口的 G10,与之前用EB 后染的条件一模一样。 但是电泳条带就是这个样子的。。希望指点。

1118.jpg
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
38楼: Originally posted by yuqianswim at 2015-01-19 20:49:35
我最近用SYBR@gold跑胶和楼主的一模一样,之前还一直怀疑是不是我买的胶的问题,看到楼主的帖子才发现不是agrose的问题(咱们的两个的agrose不同,染料也不同,但是之前做的时候都挺好的,我唯一不同的是之前用的是 ...

是的  
后来我也想明白了。染料能和DNA结合 必定带相反电荷 在 电泳的时候也会向着反方向移动。 安全的染料号称是大分子 不能透过细胞膜 那么 带的电荷大到一定程度就会影响核酸片段的迁移 造成条带弯曲。。。。

市售的  gelred 有真有假。 真的是大分子  电泳条带弯曲。 假的是EB 勾兑的  条带没问题。。。
39楼2015-01-20 10:01:43
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们用的是Biowest lot no是111860从来没出现过你这种问题。。。
keepon
3楼2012-12-24 16:33:12
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2012-12-24 16:10:37
不是后染的吧?

之前是用EB 后染。 觉得麻烦又有危害 所以选择这个 在做胶的时候加进去。
4楼2012-12-24 20:50:17
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-12-24 16:33:12
我们用的是Biowest lot no是111860从来没出现过你这种问题。。。

你们也用gelred染液? 在做胶的时候按照1:10000 加进去吗额?
5楼2012-12-24 20:50:48
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