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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 请教使用gel red 染料的同学们,你们使用的琼脂糖都是什么品牌什么型号的?

求助!!!
实验室换了安全燃料 gelred,但是跑出的条带不是弯曲的笑脸型就是 w型的。燃料美国总部建议使用纯度更好的琼脂糖,一时也不知道该用什么。
所以 在此发问,有没有哪位同学同样使用gelred 的,电泳条带没有问题的
你们使用的琼脂糖的品牌、型号。能帮忙起身去看看货号更好!谢谢各位了、

顺便,如果有同学觉得问题不在琼脂糖,也可以指出来。。。


120V 20 min,缓冲液 1x TAE,  TAKARA 的loading buffer 6X ,琼脂糖是西班牙进口的 G10,与之前用EB 后染的条件一模一样。 但是电泳条带就是这个样子的。。希望指点。

1118.jpg
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yuqianswim

银虫 (小有名气)

我最近用SYBR@gold跑胶和楼主的一模一样,之前还一直怀疑是不是我买的胶的问题,看到楼主的帖子才发现不是agrose的问题(咱们的两个的agrose不同,染料也不同,但是之前做的时候都挺好的,我唯一不同的是之前用的是EB,现在换成了SYBR),于是我就像是不是染料的问题,果真如此:今天晚上又跑了一次,这次是后染,发现这种微笑或是波浪形的问题就没有了,就是因为SYBR是大分子,如果过和核酸结合后是会影响电泳的迁移率的,所以对于大分子的染料最好是后染,不过我下一步会试试稀释足够的倍数是不是可以再制备胶的时候加进去。
38楼2015-01-19 20:49:35
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们用的是Biowest lot no是111860从来没出现过你这种问题。。。
keepon
3楼2012-12-24 16:33:12
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2012-12-24 16:10:37
不是后染的吧?

之前是用EB 后染。 觉得麻烦又有危害 所以选择这个 在做胶的时候加进去。
4楼2012-12-24 20:50:17
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-12-24 16:33:12
我们用的是Biowest lot no是111860从来没出现过你这种问题。。。

你们也用gelred染液? 在做胶的时候按照1:10000 加进去吗额?
5楼2012-12-24 20:50:48
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