请教使用gel red 染料的同学们，你们使用的琼脂糖都是什么品牌什么型号的？ - 分子生物 - 综合其他

keepon

21楼2012-12-26 08:40:54

老夏853

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19楼: Originally posted by 胡乱走走2011 at 2012-12-26 07:55:12
琼脂糖用的生工的，gelred加入loading buffer的量是1:1000。出现这样的情况，个人感觉应该是胶没有配好，也有可能是缓冲液的问题，长时间没换或者浓度有问题。

配胶和缓冲液的问题最先想到了
现在目前怀疑是类似于这种大分子的燃料和DNA 结合以后可能会影响DNA 的迁移，不同型号品牌的琼脂糖可能凝固以后，内部网状孔状结构不同。会影响大分子的通过吧。

22楼2012-12-26 10:41:22

老夏853

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20楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-12-26 08:29:10
Goldview就是吖啶橙吧。移码诱变剂，据说毒性不下eb......

反正我觉得能和DNA 结合的都不是啥好东西。

23楼2012-12-26 10:41:47

杜杜

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听说gel red和TAKARA的Loading buffer 一起用，效果就是不好，你可以换Loading buffer 试试

24楼2012-12-26 10:45:34

老夏853

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24楼: Originally posted by 杜杜 at 2012-12-26 10:45:34
听说gel red和TAKARA的Loading buffer 一起用，效果就是不好，你可以换Loading buffer 试试

这个我倒是没考虑到，不过实验室有好几种buffer 天跟的还有艾德莱的。。效果都差不多。

25楼2012-12-26 12:54:10

老夏853

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.....。。。。。。。
请有类似经历的指点！！！
今天啥都没干就不停做琼脂糖电泳了。。。。真想爆粗口、、
1 英俊的琼脂糖在学校bbs 上发帖，本来以为会没人回复没想到一分钟内就有人联系我了，还好这里的科研环境不错！！
2  换了TBE 缓冲液，0.5x 的，据说比TAE 1 X 的缓冲能力强，结果还是那鸟样子。。。
3 用隔壁实验室的 biorad  电泳系统还是那求样子，，，虽说我们的电泳系统是国产的吧那这biorad  想必做生物的都知道。。。
4  吧gelrad 按照1:500 加到loading buffer 里面然后点样，没想到条带弯曲不说了  染料是肯定没加够的呀，条带很淡很淡很淡，，，。。。。。

最近这一个多月，电泳这么点小事情  烦死人了。导师还总是问因为什么，别的同学一朝他反应他就来找我，虽说他脾气很好但是也架不住这不停的被问啊。。。。

在此我真心希望，有没有 10月-12月在上海开放生物有限公司购买gelred 的虫子，你们用的效果如何？能跟我做个详细沟通么？？真的很感激不尽啊。帮我解决了问题，要是在上海地区。我改天请你吃饭！！！

26楼2012-12-26 22:16:18

老夏853

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15楼: Originally posted by yasmineross at 2012-12-25 10:27:53
gelred 可以直接加在样品里点胶，我们用的胶是invitrogen的，没有问题。

希望能进一步沟通。。。
请站内信我吧。
今天试了试英俊的琼脂糖还是那个原因。

27楼2012-12-26 22:17:13

wl554520877

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第一次回复帖子，朋友我们用的也是gelred也是上海开放生物有限公司的货，之前跑得不好不过最近走出来的效果也不错，琼脂糖和你用的是相同的也是西班牙的那个，我做小胶用tae30ml加的1.5ulgelred。给张图吧你看看我的结果。http://dl.vmall.com/c03fh6366f 朋友是不是你的胶没摇匀我没摇匀做出的结果也很丑也给张图吧http://dl.vmall.com/c09mqydsh6

只为毕业！没出息吧，呵呵~~

28楼2012-12-27 16:31:47

老夏853

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28楼: Originally posted by wl554520877 at 2012-12-27 16:31:47
第一次回复帖子，朋友我们用的也是gelred也是上海开放生物有限公司的货，之前跑得不好不过最近走出来的效果也不错，琼脂糖和你用的是相同的也是西班牙的那个，我做小胶用tae30ml加的1.5ulgelred。给张图吧你看看我的 ...

多谢。没摇匀的可能性几乎为零。

29楼2013-01-03 12:12:50

happyjob

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这种提倡安全无毒的染料基本上都是大分子的，没有膜透性，不会进入到细胞膜中。但是大分子一般对电泳都有影响，凝胶孔隙是一定的，本来跑胶没什么问题的，但是染料分子量一大，就会很容易造成过载现象。一般要不就是做后染，不过比较费染料。要真做预制胶的话还是尽量减少染料的添加量。根据自己试验的要求来做，也别尽信产品说明书，多稀释点，只要亮度够，就没有问题。

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30楼2013-02-22 11:17:31