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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-12-26 08:29:10
Goldview就是吖啶橙吧。移码诱变剂,据说毒性不下eb......

比EB小。。。
keepon
21楼2012-12-26 08:40:54
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 胡乱走走2011 at 2012-12-26 07:55:12
琼脂糖用的生工的,gelred加入loading buffer的量是1:1000。出现这样的情况,个人感觉应该是胶没有配好,也有可能是缓冲液的问题,长时间没换或者浓度有问题。

配胶 和缓冲液 的问题  最先想到了
现在目前怀疑是 类似于这种大分子的燃料和DNA 结合以后可能会影响DNA 的迁移,不同型号 品牌的 琼脂糖可能凝固以后,内部网状孔状结构不同。会影响大分子的通过吧。
22楼2012-12-26 10:41:22
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
20楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-12-26 08:29:10
Goldview就是吖啶橙吧。移码诱变剂,据说毒性不下eb......

反正我觉得 能和DNA 结合的 都不是啥好东西。
23楼2012-12-26 10:41:47
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杜杜

金虫 (小有名气)

听说gel red和TAKARA的Loading buffer 一起用,效果就是不好,你可以换Loading buffer 试试
24楼2012-12-26 10:45:34
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
24楼: Originally posted by 杜杜 at 2012-12-26 10:45:34
听说gel red和TAKARA的Loading buffer 一起用,效果就是不好,你可以换Loading buffer 试试

这个 我倒是没考虑到,不过实验室 有好几种buffer  天跟的 还有艾德莱的。。 效果都差不多。
25楼2012-12-26 12:54:10
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

.....。。。。。。。
请有类似经历的 指点!!!
今天啥都没干 就不停做琼脂糖电泳了 。。。。 真想爆粗口、、
1 英俊的琼脂糖 在学校bbs 上发帖 ,本来以为会没人回复 没想到一分钟内就有人联系我了, 还好这里的科研环境 不错!!
2  换了TBE 缓冲液,0.5x 的,据说比TAE 1 X 的缓冲能力强,结果还是那鸟样子。。。
3   用隔壁实验室的 biorad  电泳系统 还是那求样子,,,虽说我们的电泳系统是国产的吧 那这biorad  想必做生物的都知道。。。
4  吧gelrad 按照1:500 加到loading buffer 里面 然后点样,没想到 条带弯曲不说了  染料是肯定没加够的呀,条带很淡很淡很淡,,,。。。。。

最近这一个多月,电泳这么点小事情  烦死人了。 导师还总是问因为什么,别的同学一朝他反应 他就来找我,虽说他脾气很好 但是也架不住这不停的被问啊。。。。

在此 我真心希望,有没有 10月-12月在上海开放生物有限公司 购买gelred 的虫子,你们用的效果如何? 能跟我做个详细沟通么??真的很感激不尽啊。帮我解决了问题, 要是在上海地区。 我改天请你吃饭!!!
26楼2012-12-26 22:16:18
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by yasmineross at 2012-12-25 10:27:53
gelred 可以直接加在样品里点胶,我们用的胶是invitrogen的,没有问题。

希望能进一步沟通。。。
请站内信我吧。
今天试了试英俊的 琼脂糖 还是 那个原因。
27楼2012-12-26 22:17:13
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wl554520877

铁虫 (初入文坛)

第一次回复帖子,朋友我们用的也是gelred也是上海开放生物有限公司的货,之前跑得不好不过最近走出来的效果也不错,琼脂糖和你用的是相同的也是西班牙的那个,我做小胶用tae30ml加的1.5ulgelred。给张图吧你看看我的结果。http://dl.vmall.com/c03fh6366f 朋友是不是你的胶没摇匀我没摇匀做出的结果也很丑也给张图吧http://dl.vmall.com/c09mqydsh6
只为毕业!没出息吧,呵呵~~
28楼2012-12-27 16:31:47
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
28楼: Originally posted by wl554520877 at 2012-12-27 16:31:47
第一次回复帖子,朋友我们用的也是gelred也是上海开放生物有限公司的货,之前跑得不好不过最近走出来的效果也不错,琼脂糖和你用的是相同的也是西班牙的那个,我做小胶用tae30ml加的1.5ulgelred。给张图吧你看看我的 ...

多谢。没摇匀的可能性 几乎为零。
29楼2013-01-03 12:12:50
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happyjob

新虫 (初入文坛)

这种提倡安全无毒的染料基本上都是大分子的,没有膜透性,不会进入到细胞膜中。但是大分子一般对电泳都有影响,凝胶孔隙是一定的,本来跑胶没什么问题的,但是染料分子量一大,就会很容易造成过载现象。一般要不就是做后染,不过比较费染料。要真做预制胶的话还是尽量减少染料的添加量。根据自己试验的要求来做,也别尽信产品说明书,多稀释点,只要亮度够,就没有问题。
30楼2013-02-22 11:17:31
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