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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 请教使用gel red 染料的同学们,你们使用的琼脂糖都是什么品牌什么型号的?

求助!!!
实验室换了安全燃料 gelred,但是跑出的条带不是弯曲的笑脸型就是 w型的。燃料美国总部建议使用纯度更好的琼脂糖,一时也不知道该用什么。
所以 在此发问,有没有哪位同学同样使用gelred 的,电泳条带没有问题的
你们使用的琼脂糖的品牌、型号。能帮忙起身去看看货号更好!谢谢各位了、

顺便,如果有同学觉得问题不在琼脂糖,也可以指出来。。。


120V 20 min,缓冲液 1x TAE,  TAKARA 的loading buffer 6X ,琼脂糖是西班牙进口的 G10,与之前用EB 后染的条件一模一样。 但是电泳条带就是这个样子的。。希望指点。

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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 胡乱走走2011 at 2012-12-26 07:55:12
琼脂糖用的生工的,gelred加入loading buffer的量是1:1000。出现这样的情况,个人感觉应该是胶没有配好,也有可能是缓冲液的问题,长时间没换或者浓度有问题。

配胶 和缓冲液 的问题  最先想到了
现在目前怀疑是 类似于这种大分子的燃料和DNA 结合以后可能会影响DNA 的迁移,不同型号 品牌的 琼脂糖可能凝固以后,内部网状孔状结构不同。会影响大分子的通过吧。
22楼2012-12-26 10:41:22
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们用的是Biowest lot no是111860从来没出现过你这种问题。。。
keepon
3楼2012-12-24 16:33:12
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2012-12-24 16:10:37
不是后染的吧?

之前是用EB 后染。 觉得麻烦又有危害 所以选择这个 在做胶的时候加进去。
4楼2012-12-24 20:50:17
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-12-24 16:33:12
我们用的是Biowest lot no是111860从来没出现过你这种问题。。。

你们也用gelred染液? 在做胶的时候按照1:10000 加进去吗额?
5楼2012-12-24 20:50:48
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