24小时热门版块排行榜    

查看: 3498  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bolix

铁虫 (正式写手)

[求助] 相同条件下,taq酶可以PCR出条带,而Primer star却不能

我正在从细菌基因组里扩增目的基因
起初用的taq酶,扩增出来很亮,但结果测序错了一个碱基
后来转用TAKARA的Primer star
相同条件下却扩增不出来了
降低退火温度到49度还是不行(Taq酶用的是55度)
请教大家,是什么原因?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不同的DNA聚合酶有不同的最适引物浓度和模板浓度。你可以参考一下说明书的建议。
3楼2012-12-20 14:30:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
肯定是taq酶效率高,多选几个,会有正确的吧
也可以用Platinum® Taq DNA Polymerase High Fidelity试试
2楼2012-12-20 13:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
也正常的,Taq酶保真性差,但是扩增效果好;而Primer star保真性好,但效果不一定比Taq酶好。换扩增效果同Taq酶差不多的Taq-plus试试,或者你自己做个Taq-plus,Taq里面加点Pfu或者Primer star。
4楼2012-12-20 14:49:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bolix

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-12-20 14:49:07
也正常的,Taq酶保真性差,但是扩增效果好;而Primer star保真性好,但效果不一定比Taq酶好。换扩增效果同Taq酶差不多的Taq-plus试试,或者你自己做个Taq-plus,Taq里面加点Pfu或者Primer star。

谢谢。我就是用的天根的Taq plus,但仍然错了一个碱基。
5楼2012-12-20 15:14:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 8/400 2026-03-20 11:24 by kkcoco25
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +7 Doleres 2026-03-19 7/350 2026-03-20 10:39 by EBSD
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +14 陌の森林 2026-03-18 14/700 2026-03-19 22:38 by 学员8dgXkO
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分,有科研经历,求调剂 +3 一瓶苯甲酸 2026-03-14 3/150 2026-03-19 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 287求调剂 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-19 12:32 by peike
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见