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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 关于紫外分光测脂肪酶活力的一些问题！急！
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fanjuan260

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于紫外分光测脂肪酶活力的一些问题！急！

我在测大豆食品中的脂肪酶，选的是紫外分光光度法，234nm的。有几个问题：
1.234nm处测的是什么物质，原理是啥？
2.加过无水乙醇后有絮状沉淀，是怎么回事？无水乙醇终止的原理是什么原因，是结合没反应的亚油酸吗？
新手，急，求懂的同学帮助
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1楼 2012-12-20 12:03:10
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1856029357

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你用的是啥底物。这方面我建议你在找一下相关的英文文献，我去年和师姐做过相关的。你可以先试试用最传统的滴定法做做看，234nm可能是你的底物反应生成的的颜色。无水乙醇是用来做反应终止的。絮状沉淀不知道你的反应体系是啥，油在乙醇里溶解不是很好，需要加热才行。希望你可以提供更多的信息。
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乱世出英雄，盛世皆狗熊
2楼2012-12-20 18:03:03
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fanjuan260

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 1856029357 at 2012-12-20 18:03:03
不知道你用的是啥底物。这方面我建议你在找一下相关的英文文献，我去年和师姐做过相关的。你可以先试试用最传统的滴定法做做看，234nm可能是你的底物反应生成的的颜色。无水乙醇是用来做反应终止的。絮状沉淀不知道 ...

底物就是缓冲液+亚油酸+吐温20，底物配出来是澄清的。
查了一下英文文献，体系都不太一样。你是用什么方法做的？
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3楼2012-12-21 09:49:53
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克劳德恒歌

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你的是水解酶还是氧化酶，我测过一个氧化酶的，记得文献上说的是234nm处过氧化物有吸收峰，所以可以测定，但是隔许久了不是很确定。至于无水乙醇终止反应，我猜是使酶变性失活
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主席呼来不出屋，自云臣乃宅中仙；欢迎访问敝人空间http://user.qzone.qq.com/14080193
4楼2012-12-22 23:10:51
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路漫漫89

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

树树8013: 应助指数+1, 欢迎新虫友的回帖应助 2013-03-15 22:20:47
你测的是脂肪酶氧化酶吧，不是脂肪酶吧！加入乙醇的作用是将乳化底物破乳，使酶解产物游离出来，以免直接测定使得测定结果偏小。
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5楼2013-03-15 09:10:38
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顺利一生

新虫 (初入文坛)
234nm测得是脂肪酸
乙醇会终止反应  有机溶剂会与油脂相溶
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6楼2013-08-25 23:30:17
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