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fanjuan260

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于紫外分光测脂肪酶活力的一些问题!急!

我在测大豆食品中的脂肪酶,选的是紫外分光光度法,234nm的。有几个问题:
1.234nm处测的是什么物质,原理是啥?
2.加过无水乙醇后有絮状沉淀,是怎么回事?无水乙醇终止的原理是什么原因,是结合没反应的亚油酸吗?
新手,急,求懂的同学帮助
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1856029357

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你用的是啥底物。这方面我建议你在找一下相关的英文文献,我去年和师姐做过相关的。你可以先试试用最传统的滴定法做做看,234nm可能是你的底物反应生成的的颜色。无水乙醇是用来做反应终止的。絮状沉淀不知道你的反应体系是啥,油在乙醇里溶解不是很好,需要加热才行。希望你可以提供更多的信息。
乱世出英雄,盛世皆狗熊
2楼2012-12-20 18:03:03
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fanjuan260

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 1856029357 at 2012-12-20 18:03:03
不知道你用的是啥底物。这方面我建议你在找一下相关的英文文献,我去年和师姐做过相关的。你可以先试试用最传统的滴定法做做看,234nm可能是你的底物反应生成的的颜色。无水乙醇是用来做反应终止的。絮状沉淀不知道 ...

底物就是缓冲液+亚油酸+吐温20,底物配出来是澄清的。
查了一下英文文献,体系都不太一样。你是用什么方法做的?
3楼2012-12-21 09:49:53
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克劳德恒歌

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你的是水解酶还是氧化酶,我测过一个氧化酶的,记得文献上说的是234nm处过氧化物有吸收峰,所以可以测定,但是隔许久了不是很确定。至于无水乙醇终止反应,我猜是使酶变性失活
主席呼来不出屋,自云臣乃宅中仙;欢迎访问敝人空间http://user.qzone.qq.com/14080193
4楼2012-12-22 23:10:51
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路漫漫89

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

树树8013: 应助指数+1, 欢迎新虫友的回帖应助 2013-03-15 22:20:47
你测的是脂肪酶氧化酶吧,不是脂肪酶吧!加入乙醇的作用是将乳化底物破乳,使酶解产物游离出来,以免直接测定使得测定结果偏小。
5楼2013-03-15 09:10:38
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顺利一生

新虫 (初入文坛)

234nm测得是脂肪酸
乙醇会终止反应  有机溶剂会与油脂相溶
6楼2013-08-25 23:30:17
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