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liuwei0824新虫 (初入文坛)
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关于平末端连接 已有3人参与
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大家好！我最近在做平末端连接的实验，总是做不成功，求教~~ 载体是用smal1酶切的平末端，片段是双酶切的粘性末端，酶切后，载体进行去磷酸化，片段进行末端补平，然后进行连接反应（16℃过夜），然后转化，平板上都不长菌。。。。 一开始载体是在30度酶切2h，片段在37度酶切2h，跑电泳后发现，载体只是部分被切开了，然后酶切时间就改成了过夜，结果都切没了，，， 所有的酶都用的是Takara公司的。 求高人指点啊！！！谢谢啦O(∩_∩)O~ |
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