应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家是不是都有蛋白膠粘的上不去樣的時候啊，腫麼辦？？
81/1返回列表
查看: 481  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

[交流] 大家是不是都有蛋白膠粘的上不去樣的時候啊，腫麼辦？？

直接用細胞或者細菌裂解液直接跑蛋白膠總那麼粘啊？上不進去樣。。。大家有什麽辦法改善嗎還不影響樣品質量的？？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-12-17 12:27:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
loveskyzhou(金币+1): 谢谢参与
你的样品浓度太高了，如果稀释度合适的话不会出现这个问题。此外如果是样品中主要是膜蛋白且浓度较高时，不适合高温加热。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

loveskyzhou
2楼2012-12-17 13:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)
送鲜花一朵
???????:
2?: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-17 13:18:45
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

???????????????Щ~  ????????????????????f????????????????????????????????l?_???N?????????????????N??
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-17 17:11:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
???????:
3?: Originally posted by loveskyzhou at 2012-12-17 17:11:36
???????????????Щ~  ????????????????????f????????????????????????????????l?_???N?????????????????N??...

?????????ò????У?????????????±?????????????????buffer????????????????а??????飬??????????????????????????????????1ml?????????300-400ul buffer??????
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-18 07:29:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
★
loveskyzhou(金币+1): 谢谢参与
DNA酶消化试试
回复此楼
6楼2012-12-18 09:22:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-17 13:18:45
你的样品浓度太高了，如果稀释度合适的话不会出现这个问题。此外如果是样品中主要是膜蛋白且浓度较高时，不适合高温加热。

我發現樣品室溫放了2天以後自然就好上樣了。。。。不過這樣會不會蛋白降解了呢？
我在樣品里加了loading buffer 和 1%的DDM（去垢劑），網上說還要加蛋白酶抑製劑，可是加了loading buffer以後蛋白酶自身不也失活了嗎？
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-19 16:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
loveskyzhou: 金币+2, 謝謝 2012-12-20 09:53:23
引用回帖:
7楼: Originally posted by loveskyzhou at 2012-12-19 16:40:15
我發現樣品室溫放了2天以後自然就好上樣了。。。。不過這樣會不會蛋白降解了呢？
我在樣品里加了loading buffer 和 1%的DDM（去垢劑），網上說還要加蛋白酶抑製劑，可是加了loading buffer以後蛋白酶自身不也失活 ...

没有试过把粘的样品放置再看的。不过我想应该不是蛋白降解了，因为有loading buffer，蛋白酶应该不起作用的。
你如果做的是变性胶的话当然不用加什么蛋白酶抑制剂。loading buffer里面的SDS会使酶变性失活的。如果你做native PAGE的话，蛋白样品是非变性条件下当然需要蛋白酶抑制剂。
赞一下 回复此楼
8楼2012-12-20 08:40:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
yingying15884楼
2012-12-17 19:04   回复  
loveskyzhou(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 loveskyzhou 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭