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大家是不是都有蛋白膠粘的上不去樣的時候啊,腫麼辦??
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loveskyzhou
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[交流]
大家是不是都有蛋白膠粘的上不去樣的時候啊,腫麼辦??
直接用細胞或者細菌裂解液直接跑蛋白膠總那麼粘啊?上不進去樣。。。大家有什麽辦法改善嗎還不影響樣品質量的???
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2012-12-17 12:27:55
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Originally posted by
loveskyzhou
at 2012-12-17 17:11:36
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5楼
2012-12-18 07:29:07
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★
loveskyzhou(金币+1): 谢谢参与
你的样品浓度太高了,如果稀释度合适的话不会出现这个问题。此外如果是样品中主要是膜蛋白且浓度较高时,不适合高温加热。
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loveskyzhou
2楼
2012-12-17 13:18:45
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Originally posted by
cicelyzh
at 2012-12-17 13:18:45
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2楼
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cicelyzh
at 2012-12-17 13:18:45
你的样品浓度太高了,如果稀释度合适的话不会出现这个问题。此外如果是样品中主要是膜蛋白且浓度较高时,不适合高温加热。
我發現樣品室溫放了2天以後自然就好上樣了。。。。不過這樣會不會蛋白降解了呢?
我在樣品里加了loading buffer 和 1%的DDM(去垢劑),網上說還要加蛋白酶抑製劑,可是加了loading buffer以後蛋白酶自身不也失活了嗎?
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7楼
2012-12-19 16:40:15
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