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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求教SPE柱的使用方法
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dong_yue

金虫 (小有名气)

[求助] 求教SPE柱的使用方法

我买了个C18未封端的SPE柱，不知道使用步骤，还请各位大侠指教。在此，小女先谢过各位大侠了。
另外就是，我要萃取的是脂肽类物质，我应该用什么溶剂去洗脱？
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1楼2012-12-17 11:25:15
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

对于c18来说，80%的乙腈是有很强的洗脱能力的，如果上样量大些的话，会把你的样品带下来
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
8楼2012-12-17 15:25:51
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 鼓励交流~ 2012-12-17 12:26:36
dong_yue: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-12-17 14:36:53
这个可以理解成是一根c18分析柱来使用。。先吸附上样，小比例有机相除盐或者一些杂质，大比例有机相把目标物洗脱下来。。不了解楼主的物质性质，具体方法还是得自己摸索。
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dong_yue
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
2楼2012-12-17 11:35:15
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dong_yue

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by akosrios at 2012-12-17 11:35:15
这个可以理解成是一根c18分析柱来使用。。先吸附上样，小比例有机相除盐或者一些杂质，大比例有机相把目标物洗脱下来。。不了解楼主的物质性质，具体方法还是得自己摸索。

谢谢~~C18柱预处理的步骤是怎么样操作的呢？另外洗脱加压是离心还是直接用洗耳球就可以了呢？
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3楼2012-12-17 11:48:55
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

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3楼: Originally posted by dong_yue at 2012-12-17 11:48:55
谢谢~~C18柱预处理的步骤是怎么样操作的呢？另外洗脱加压是离心还是直接用洗耳球就可以了呢？...

首先要确认该柱有没有使用注意事项

c18常规来说，先用甲醇处理，然后用10%左右的甲醇水溶液活化，试验完成后一般也是用甲醇处理柱子，把强保留物质洗掉。

常用溶剂还有乙腈。

加压方式我只见过用泵或者注射器加压的，离心的没见过。。洗耳球。。。会不会很累啊。。当然可能也有效果
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dong_yue
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4楼2012-12-17 12:21:48
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dong_yue

金虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by akosrios at 2012-12-17 12:21:48
首先要确认该柱有没有使用注意事项

c18常规来说，先用甲醇处理，然后用10%左右的甲醇水溶液活化，试验完成后一般也是用甲醇处理柱子，把强保留物质洗掉。

常用溶剂还有乙腈。

加压方式我只见过用泵或者注 ...

我的样品溶解在乙腈三氟乙酸里的。洗脱的话，我是用极性小的溶剂洗脱吗？越小越好吗？
另外如果直接是发酵液可以直接上柱子吗？
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5楼2012-12-17 12:54:11
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by dong_yue at 2012-12-17 12:54:11
我的样品溶解在乙腈三氟乙酸里的。洗脱的话，我是用极性小的溶剂洗脱吗？越小越好吗？
另外如果直接是发酵液可以直接上柱子吗？...

c18一般要避免用纯的有机溶剂上样，用水最好


发酵液没接触过，能不能直接上我不太清楚，但是如果太杂了，柱子会很快坏掉。。。

前处理还是需要的。
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6楼2012-12-17 12:59:25
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dong_yue

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by akosrios at 2012-12-17 12:59:25
c18一般要避免用纯的有机溶剂上样，用水最好


发酵液没接触过，能不能直接上我不太清楚，但是如果太杂了，柱子会很快坏掉。。。

前处理还是需要的。...

额，我的样是溶解在80%乙腈0.1%三氟乙酸里面的。这样影响会很大么？
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7楼2012-12-17 14:52:35
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dong_yue

金虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by akosrios at 2012-12-17 15:25:51
对于c18来说，80%的乙腈是有很强的洗脱能力的，如果上样量大些的话，会把你的样品带下来

那么对于C18来说是不是极性越小洗脱能力就越强？
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9楼2012-12-17 15:45:38
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

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★ ★ ★ ★
dong_yue: 金币+4, ★★★★★最佳答案, 谢谢指导~~~ 2012-12-18 16:01:00
引用回帖:
9楼: Originally posted by dong_yue at 2012-12-17 15:45:38
那么对于C18来说是不是极性越小洗脱能力就越强？...

理论上是这样，当然不排除一些特殊例子
所以水的极性最强，对C18来说洗脱能力最弱
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10楼2012-12-17 16:08:51
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