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china.changmm木虫 (小有名气)
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标记蛋白中的triton试剂作用
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实验步骤如下: 将盖玻片置于12孔板上,使细胞在盖玻片上爬片生长,待生长融合后加入吸收促进剂作用2 h。 PBS漂洗两次,每次5 min, 5% 多聚甲醛固定15 min. 0.4 % triton-100 孵育5 min, PBS 漂洗2次,每次5 min. 5% BSA 室温封闭1 h. 加入稀释后的抗体,4 °C过夜。 PBS漂洗3次,每次5 min,蒸馏水漂洗一次,5 min; 封片,显微镜下观察。 请问其中0.4 % triton-100 和 BSA 室温封闭具体作用是什么?还有最后一步甘油封面的目的是什么,用指甲油封片不行么? |
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