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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pH示差法，计算的不知道对不对，请大家帮忙指导，谢谢！
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vivian_63

铜虫 (初入文坛)

[求助] pH示差法，计算的不知道对不对，请大家帮忙指导，谢谢！

称取1g黑米粉，料液比是1:20，提取后分别吸取5mL，再分别用pH4.5和pH1.0的缓冲溶液稀释至10mL，在最大吸收波长处测其吸光值，用pH示差法测花色苷含量，计算
公式是C（mg/g）=(A0-A1)*V*n*M/(m*k)   
V-提取后，需要定容的体积
n-测定时候稀释的倍数
M-449.2（花色苷的平均分子量）
m-原料重
k其实是摩尔消光系数，是26900.
C=（ApH1.0-ApH4.5)*20*2*449.2/(1*23900)
不知道带入的数字对不对，请大家帮忙指点，谢谢~
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1楼 2012-12-11 19:04:37
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北国雪91

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
vivian_63: 金币+2, ★有帮助 2012-12-12 19:11:17
我又来了。
    你提取的时候料液比是1比20，确定提取过后溶剂没有损失吗？提取过后最好离心，然后抽滤，因为你直接取提取液里面会有很多杂质，对吸光值影响比较大，离心后的上清液再用滤纸（我当时用的是双层的）过滤，每个步骤都会有少量的损失，但是对所有的操作都是这样，都一样损失，所以基本可以不用担心的，然后在定容，再取几毫升加缓冲液测量。那么你上面公式中的20就变成了你定容的体积。
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771030883
notingisimpossible
2楼2012-12-12 10:18:03
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vivian_63

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国雪91 at 2012-12-12 10:18:03
我又来了。
    你提取的时候料液比是1比20，确定提取过后溶剂没有损失吗？提取过后最好离心，然后抽滤，因为你直接取提取液里面会有很多杂质，对吸光值影响比较大，离心后的上清液再用滤纸（我当时用的是双层的） ...

哦，知道了，非常感谢~
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-12 19:10:54
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771030883

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国雪91 at 2012-12-12 10:18:03
我又来了。
    你提取的时候料液比是1比20，确定提取过后溶剂没有损失吗？提取过后最好离心，然后抽滤，因为你直接取提取液里面会有很多杂质，对吸光值影响比较大，离心后的上清液再用滤纸（我当时用的是双层的） ...

请问用缓冲溶液定容后用静置一段时间吗？矢车菊标样用酸性溶剂溶解还是只是溶剂溶解
赞一下 回复此楼
只要选择了，就要一往直前!
4楼2014-10-25 09:29:23
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