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vivian_63

铜虫 (初入文坛)

[求助] pH示差法,计算的不知道对不对,请大家帮忙指导,谢谢!

称取1g黑米粉,料液比是1:20,提取后分别吸取5mL,再分别用pH4.5和pH1.0的缓冲溶液稀释至10mL,在最大吸收波长处测其吸光值,用pH示差法测花色苷含量,计算
公式是C(mg/g)=(A0-A1)*V*n*M/(m*k)   
V-提取后,需要定容的体积
n-测定时候稀释的倍数
M-449.2(花色苷的平均分子量)
m-原料重
k其实是摩尔消光系数,是26900.
C=(ApH1.0-ApH4.5)*20*2*449.2/(1*23900)
不知道带入的数字对不对,请大家帮忙指点,谢谢~
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北国雪91

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
vivian_63: 金币+2, ★有帮助 2012-12-12 19:11:17
我又来了。
    你提取的时候料液比是1比20,确定提取过后溶剂没有损失吗?提取过后最好离心,然后抽滤,因为你直接取提取液里面会有很多杂质,对吸光值影响比较大,离心后的上清液再用滤纸(我当时用的是双层的)过滤,每个步骤都会有少量的损失,但是对所有的操作都是这样,都一样损失,所以基本可以不用担心的,然后在定容,再取几毫升加缓冲液测量。那么你上面公式中的20就变成了你定容的体积。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

notingisimpossible
2楼2012-12-12 10:18:03
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vivian_63

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国雪91 at 2012-12-12 10:18:03
我又来了。
    你提取的时候料液比是1比20,确定提取过后溶剂没有损失吗?提取过后最好离心,然后抽滤,因为你直接取提取液里面会有很多杂质,对吸光值影响比较大,离心后的上清液再用滤纸(我当时用的是双层的) ...

哦,知道了,非常感谢~
3楼2012-12-12 19:10:54
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771030883

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国雪91 at 2012-12-12 10:18:03
我又来了。
    你提取的时候料液比是1比20,确定提取过后溶剂没有损失吗?提取过后最好离心,然后抽滤,因为你直接取提取液里面会有很多杂质,对吸光值影响比较大,离心后的上清液再用滤纸(我当时用的是双层的) ...

请问用缓冲溶液定容后用静置一段时间吗?矢车菊标样用酸性溶剂溶解还是只是溶剂溶解
只要选择了,就要一往直前!
4楼2014-10-25 09:29:23
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