| 查看: 4397 | 回复: 7 | ||
daisyhappy铜虫 (小有名气)
|
[求助]
QPCR模板RNA逆转录为CDNA后，CT值过大
|
|
请教大家一个问题，由于试剂盒中的标准品是RNA，但是这个不好保存太不稳定易降解，所以我现在讲其全部一次性逆转录成CDNA，想用这个作为标准品进行定量。但是将CDNA进行梯度稀释以后，发现CT值偏大，一般在28以后，最大的到38，根本无法准确定量。电泳检测还是有产物的。想请问大家： 1.有没有好的方法解决这种标准品是RNA的问题？或者溶在乙醇里面保存？ 2.我开始做的几次QPCR复孔重复性挺好的，但是现在做总是重复性不好。不知道哪里出了问题？我用的试剂等分别是一个厂家的，但是不同的试剂盒。 请大家帮忙分析，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有85人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- RNA逆转录成cDNA后再-20度能保存多久？
已经有5人回复
2楼2012-12-10 14:57:13
daisyhappy
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 88.8
- 散金: 5
- 帖子: 74
- 在线: 210.3小时
- 虫号: 1872684
- 注册: 2012-06-29
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
3楼2012-12-10 17:27:39
4楼2012-12-11 14:12:23
daisyhappy
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 88.8
- 散金: 5
- 帖子: 74
- 在线: 210.3小时
- 虫号: 1872684
- 注册: 2012-06-29
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
5楼2012-12-12 12:39:14
6楼2012-12-12 16:57:57
feixiang1209
新虫 (初入文坛)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 99.1
- 红花: 1
- 帖子: 31
- 在线: 7.6小时
- 虫号: 1801895
- 注册: 2012-05-07
- 专业: 膜生物化学与膜生物物理学
7楼2013-05-07 21:12:18
沙门小rna
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 1117.7
- 散金: 5
- 红花: 6
- 沙发: 6
- 帖子: 644
- 在线: 76.7小时
- 虫号: 2012528
- 注册: 2012-09-19
- 专业: 病原细菌、细菌感染与宿主
8楼2013-11-04 13:19:43
