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RACE 3'基因pcr 泡出来的条带是100多bp!!!!到底是不是我的目的基因呀
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RACE 3'基因pcr 泡出来的条带是100多bp!!!!到底是不是我的目的基因呀
在做基因的3‘RACE 用持家基因PCR有结果 也就是cDNA模板没有问题 但是PCR3’RACE 的条带只有一条100多bp的条带。。。。囧。。。。到底是不是我的目的条带呀。。。。求大家指点我这个菜鸟
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9楼
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Originally posted by
yoyo单眼皮
at 2012-12-09 16:42:56
要测的话就要连接T载体~ 那个,我想问问你知不知道3‘RACE用的特异性引物是 R 还是F?~师姐跟我说是R 我个人觉得应该是F 呀...
你师姐说的是对的,用R
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2012-12-09 17:34:15
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2012-12-08 20:47:31
这个需要设计引物进一步验证,在你RACE到的3‘端设计引物,以cDNA为模板做PCR验证
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2012-12-08 20:39:58
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2楼
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Originally posted by
gyesang
at 2012-12-08 20:39:58
这个需要设计引物进一步验证,在你RACE到的3‘端设计引物,以cDNA为模板做PCR验证
你是说再设计一个3’端的特异性引物??是这个意思么。
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2012-12-08 20:47:08
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3楼
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Originally posted by
yoyo单眼皮
at 2012-12-08 20:47:08
你是说再设计一个3’端的特异性引物??是这个意思么。...
是的,在你RACE到的那段序列上设计
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2012-12-08 21:02:55
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Originally posted by
gyesang
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是的,在你RACE到的那段序列上设计...
RACE到的那段序列是什么意思。。。。
我懵了 是我现在特异引物上游的序列设计一个 特异性引物是么?
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2012-12-08 21:42:26
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yoyo单眼皮
at 2012-12-08 21:42:26
RACE到的那段序列是什么意思。。。。
我懵了 是我现在特异引物上游的序列设计一个 特异性引物是么?...
你不是说你 PCR3’RACE 的条带只有一条100多bp的条带 吗?
难道还没有送测序?我说是在这一条100多bp的条带上设计引物
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Originally posted by
gyesang
at 2012-12-08 23:03:41
你不是说你 PCR3’RACE 的条带只有一条100多bp的条带 吗?
难道还没有送测序?我说是在这一条100多bp的条带上设计引物...
是要送去 但是一百多BP不能测 误差太大
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2012-12-09 15:35:39
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yoyo单眼皮
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是要送去 但是一百多BP不能测 误差太大...
这个没有关系的,测了再说
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2012-12-09 16:29:38
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这个没有关系的,测了再说...
要测的话就要连接T载体~ 那个,我想问问你知不知道3‘RACE用的特异性引物是 R 还是F?~师姐跟我说是R 我个人觉得应该是F 呀
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