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小齐018

木虫 (初入文坛)

[求助] Triozl法提植物RNA电泳图大家帮我分下分析

大家帮我分析下我的RNA能不能用,谢谢啊,新手提的!为什么第一条带那么亮,还有拖尾现象是为啥?多谢了!

Administrator 2012-12-06 20hr 46min.jpg
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 小齐018 at 2012-12-07 13:42:54
降解是不是研磨的时候造成的?还是后面加氯仿和异丙醇的时候造成的?多谢了,亲,我第一次提经验不足!...

研磨的时候你是在液氮下做的吧?低温下减少宿主本身带有的核酸酶降解RNA。等到后面用酚氯仿是为了除去蛋白,除去蛋白的核酸由异丙醇沉淀析出。
14楼2012-12-08 09:34:43
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bloodwar

银虫 (小有名气)

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首先是你的胶放反了吧,不知道你最后RNA的用途是什么,如果要做低浓度的实验的话,你的RNA质量就不行
2楼2012-12-07 05:43:19
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-12 19:49:31
胶反了。点样孔有些脏,有蛋白污染。不知道你上了多少样。提得好的总RNA可以看到3条带,28S最亮,约为18S的两倍。5S的带要暗一些。
3楼2012-12-07 07:41:45
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-12 19:49:43
1 胶放反了
2 最小的那条带非常亮,RNA降解了。
3 胶空有杂物,影响下游实验
4 第一条,第二条带都不亮

总的来说质量是非常差,重新提取吧。
4楼2012-12-07 10:56:28
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