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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » southern技术请教
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

[交流] southern技术请教

有个问题请教一下各位高手，我做southern杂交出来的结果，有不少非特异性带，当然倒是没有主带亮。我的杂交温度是55度，探针长度四百多，用的fermentous的生物素标记探针。我杂交时间可能也有点长了，大概有三十个小时了。请大家帮我分析指教一下吧，非常感谢啦。
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1楼 2012-12-05 22:16:15
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五泉山人

金虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
linxi8579: 金币+1 2012-12-08 10:11:13
如果靶序列>5kb，需进行脱嘌呤处理
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4楼2012-12-07 14:50:33
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
linxi8579: 金币+2 2012-12-07 14:37:22
杂交时间是够长的，稍微提高一点杂交温度试试。
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2楼2012-12-06 08:44:39
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-06 08:44:39
杂交时间是够长的，稍微提高一点杂交温度试试。

恩，看来是这样了。本来我是想着杂交过夜，后来有事就多杂了会儿，呵呵。谢谢啦。
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3楼2012-12-07 14:37:16
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 五泉山人 at 2012-12-07 14:50:33
如果靶序列>5kb，需进行脱嘌呤处理

这个我的倒是没有，两个片段时两千多和一千多。并且我有用盐酸磺化，估计就是脱嘌呤了。。谢谢。
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5楼2012-12-08 10:12:15
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