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southern技术请教
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linxi8579
铜虫
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[交流]
southern技术请教
有个问题请教一下各位高手,我做southern杂交出来的结果,有不少非特异性带,当然倒是没有主带亮。我的杂交温度是55度,探针长度四百多,用的fermentous的生物素标记探针。我杂交时间可能也有点长了,大概有三十个小时了。请大家帮我分析指教一下吧,非常感谢啦。
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2012-12-05 22:16:15
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cicelyzh
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2012-12-07 14:37:22
杂交时间是够长的,稍微提高一点杂交温度试试。
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2楼
2012-12-06 08:44:39
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linxi8579
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2楼
:
Originally posted by
cicelyzh
at 2012-12-06 08:44:39
杂交时间是够长的,稍微提高一点杂交温度试试。
恩,看来是这样了。本来我是想着杂交过夜,后来有事就多杂了会儿,呵呵。谢谢啦。
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3楼
2012-12-07 14:37:16
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五泉山人
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如果靶序列>5kb,需进行脱嘌呤处理
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2012-12-07 14:50:33
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linxi8579
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4楼
:
Originally posted by
五泉山人
at 2012-12-07 14:50:33
如果靶序列>5kb,需进行脱嘌呤处理
这个我的倒是没有,两个片段时两千多和一千多。并且我有用盐酸磺化,估计就是脱嘌呤了。。谢谢。
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5楼
2012-12-08 10:12:15
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