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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 超氧化物歧化酶

今天测SOD的时候,加了100微升的酶液去光照了,照了半天不怎么变色,郁闷啊,心想这个指标都能出问题?后来我看没加酶液照光的颜色变得很快很深,觉着自己试剂配的没问题,觉着可能酶液加多了,导致NBT和酶液反应了了所以不变色,然后我又重新改成50微升酶液去照光,效果好多了,但是最高浓度的还是几乎不变色,测的数据是0.0XXX,感觉可能里面的超氧化物歧化酶较多

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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
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桐眠

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我一般做实验就加50微升的提取液,但是如果提取液浓度很高的话可以加更少,我们再做光合作用的酶活时加的很少,通常只有10微升。
2楼2012-12-04 10:36:04
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num20062622

银虫 (正式写手)

楼主你测过CAT和POD不
我有个问题想问下你...
3楼2012-12-07 21:37:59
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by num20062622 at 2012-12-07 21:37:59
楼主你测过CAT和POD不
我有个问题想问下你...

问什么呀。。。我懂的都告诉你。。。
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
4楼2012-12-09 20:18:46
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num20062622

银虫 (正式写手)

你测CAT和POD的时候
有对照么?
我一个师姐测CAT和POD的时候只用
一个加体系和酶液的比色皿在光度计里测..
都没有调零管(对照管)
5楼2012-12-09 20:26:12
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by num20062622 at 2012-12-09 20:26:12
你测CAT和POD的时候
有对照么?
我一个师姐测CAT和POD的时候只用
一个加体系和酶液的比色皿在光度计里测..
都没有调零管(对照管)

不调零能测吸光度?也有用空气调零的,就是槽里什么不加就调零,什么样的分光光度计,我的是两个槽的,我CAT用2.9mLpH=7.0d的磷酸盐缓冲液+0.1mLpH=7.8的磷酸盐缓冲液(就是研磨酶养时加的提取液)调零。POD直接用3mLpH=7.0的磷酸盐缓冲液调零。我们实验室测蚯蚓的还有加酶液调零的呢,我也没搞懂啥意思,可能方法不一样,他们CAT测250nm下的吸光度。
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
6楼2012-12-10 15:10:41
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num20062622

银虫 (正式写手)

恩 我师姐她就直接用了一个石英比色皿(加了反应体系和酶液)放在槽里(我们的分光光度计是两个槽的)进行时间扫描的 她这样做是不是相当于你说的空气调零?
她测POD和CAT都是这么弄的 就一个比色皿开始测...里面那个槽什么都没有放。

对于你说的那个SOD哈 没有颜色 是不是你的SOD酶活性太高了...
SOD活性太高抑制显色吧
7楼2012-12-11 14:28:14
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num20062622

银虫 (正式写手)

帅哥 你是不是经常测生理酶活啊。。
能不能加个Q有什么问题交流一下?
8楼2012-12-11 14:37:17
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by num20062622 at 2012-12-11 14:28:14
恩 我师姐她就直接用了一个石英比色皿(加了反应体系和酶液)放在槽里(我们的分光光度计是两个槽的)进行时间扫描的 她这样做是不是相当于你说的空气调零?
她测POD和CAT都是这么弄的 就一个比色皿开始测...里面那 ...

嗯是太高了,酶液加的又多,我稀释后就好了
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
9楼2012-12-12 20:31:25
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by num20062622 at 2012-12-11 14:37:17
帅哥 你是不是经常测生理酶活啊。。
能不能加个Q有什么问题交流一下?

可以啊,我也刚刚开始测,懂的不多,所以我经常来这问人家高手,我的Q71854625
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
10楼2012-12-12 20:32:01
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