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tianhui725

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 请问有谁用过millipore的超滤管？

我想测细胞分泌的细胞因子，用millipore的超滤管将我需要的蛋白滤出，但是为什么相同体积（5ml）的上清，同时离心，剩下的液体体积却不同？有些剩下三百微升，有些五百微升。我该怎么控制将其条件设置成相同啊？求高人指点。

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1楼 2012-12-03 22:28:12

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hallen6891

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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tianhui725: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-05 08:57:54
tianhui725: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-05 15:57:05
小丹木木: 金币+3, 鼓励热心应助 2012-12-05 17:25:42

你用的应该是15ml的那种超滤管吧，如果是新管子的话，应该不会出现这种问题的，我之前做过，但是当你用过几次之后，由于它上面的滤膜会吸附一些杂质，如果你清洗不彻底的话，就会改变其透过能力，导致你说的这种情况发生，建议你超滤之后在调整一下体积至一致。还有，用超滤浓缩的话，会丢失一些目的蛋白的，而且，我看你写的是目的蛋白滤出，那这样的话，你需要的蛋白应该在下边的啊，这种情况下，我都是丙酮沉淀之后才溶解分析的。