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zjytiantang

金虫 (小有名气)


[交流] 液相HPLC 的两个峰太近了分不开 求高人指点! 有图

液相HPLC的两个峰离着太近了分不开,求高人指点!
而且保留时间一直是2分多,C18的柱子,流动相从全甲醇~甲醇水~全水,都试过了 现在不想管保留时间了,就想把两个峰分开~ 希望各位大侠多多指点!
样品是没衍生的组氨酸,组氨酸和一个结构改造的组氨酸跑的。

psb.jpg

[ Last edited by zjytiantang on 2012-12-3 at 11:26 ]
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hxl4054

铁杆木虫 (知名作家)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zjytiantang: 金币+1, 嗯嗯 降低流速会不会好些呢 2012-12-03 11:25:05
兄弟  是不是没怎么跑过液相啊

看你的图里面至少有3个组分

2.5分钟出峰确实太早了  几乎不可能分开

根据你说的“保留时间一直是2分多,C18的柱子,流动相从全甲醇~甲醇水~全水”,可能是柱子不行了,有条件的话换根柱子试试

或者根据你的化合物结构,调整一下流动相,加点酸或碱,说不定效果好很多
8楼2012-12-03 10:46:05
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wanghq121

至尊木虫 (著名写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zjytiantang: 金币+1 2012-12-03 10:48:26
先用甲醇-水来跑,你这个柱子根本吸收就出来,甲醇太高了。
2楼2012-12-03 09:26:40
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zjytiantang: 金币+1, 跑的是没有衍生的氨基酸 是同一种氨基酸 就是氨基酸结构稍稍做了修改 2012-12-03 10:50:13
物质没被保留,2.5min就想分离,和死时间差不多,UPLC差不多。让别人给建议至少提供分析对象吧。
3楼2012-12-03 09:30:32
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32862500

木虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zjytiantang: 金币+1, 缓冲盐和离子对是什么呢~ 是试剂么 我不太懂分析~ 3Q啦 2012-12-03 10:51:05
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流 2012-12-03 20:33:19
你的物质没保留 可以参考如下几种方法
1  换柱,这么短的时间是不能分开的(如亲水柱)
2  换流动相,用缓冲盐或者离子对
3 用正相来体系来试试
4楼2012-12-03 09:37:38
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