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多个基因共表达纯化问题
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请教共表达两个基因以及表达后如何纯化。具体为 两个基因都有完整阅读框,之间加有rbs,如何连接到pet28,能实现共表达吗? 另外,就是如果共表达了,第一个蛋白可以利用载体的His标签纯化,那第二个也能纯化吗?如果不能,是不是应该在它前面加上His标签呢? |
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12楼2012-12-03 13:18:01
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susizheng
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【答案】应助回帖
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coh2lxx: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-29 15:04:35
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小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-12-03 16:35:52
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1、连接的话,先连接A基因到pet28,B基因借助另外一个载体,连接后,扩增RBS-B基因进行第二次连接; 2、T7启动子共表达两个基因没问题。 3、共表达主要是做催化用的,做纯化没必要共表达吧。分开表达纯化不是更好? 如果确实像同时纯化也行,在扩增第二个基因的引物上加上his标签就行。 |

3楼2012-11-29 13:55:08
4楼2012-11-29 15:04:24













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