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多个基因共表达纯化问题
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请教共表达两个基因以及表达后如何纯化。具体为 两个基因都有完整阅读框，之间加有rbs，如何连接到pet28，能实现共表达吗？ 另外，就是如果共表达了，第一个蛋白可以利用载体的His标签纯化，那第二个也能纯化吗？如果不能，是不是应该在它前面加上His标签呢？ |
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susizheng
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
coh2lxx: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-29 15:04:35
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1、连接的话，先连接A基因到pet28，B基因借助另外一个载体，连接后，扩增RBS-B基因进行第二次连接； 2、T7启动子共表达两个基因没问题。 3、共表达主要是做催化用的，做纯化没必要共表达吧。分开表达纯化不是更好？ 如果确实像同时纯化也行，在扩增第二个基因的引物上加上his标签就行。 |
3楼2012-11-29 13:55:08
2楼2012-11-29 11:43:58
4楼2012-11-29 15:04:24
5楼2012-11-29 15:12:45