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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取DNA出现弥散------求助
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素素2008

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取DNA出现弥散------求助

Sample TextSample Text求助：
     小虫做海洋藻类的DNA提取。虽然有条带，但是有很长的弥散拖带，求助：这是什么原因？因为DNA浓度很低，只有20ng/ml,所以模板量加的比较多。有4ul。用mix做的。引物为2ul。
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    • 2012-11-27 11:17:55, 162.77 K

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1楼 2012-11-27 11:21:19
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by 素素2008 at 2012-11-30 17:04:51
哦哦，不过，虫友，我提取的DNA浓度本来就比较低了。只有十几ng/ul，所以，要是稀释十倍，就更低了。感觉没法再稀释了。
不知道虫友做的，浓度大概有多少？...

要相信taq酶的能力，DNA多了才是真的扩增不出来……
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19楼2012-12-01 13:38:51
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品里可能有RNA，弥散的是不完全降解的RNA吧。还有，20ng/ml好像是很低啊，确定不是20ng/ul吗？做PCR模板的话，10-50ng DNA就够了。
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素素2008
2楼2012-11-27 11:56:07
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素素2008

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-27 11:56:07
样品里可能有RNA，弥散的是不完全降解的RNA吧。还有，20ng/ml好像是很低啊，确定不是20ng/ul吗？做PCR模板的话，10-50ng DNA就够了。

哦哦。不好意思，是20ng/ul，不小心写错了。不过，提取时加入了RNA酶的。加了两ul。不知道是不是加的少了？
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3楼2012-11-27 13:13:13
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
得看你RNA酶的浓度哈~你这个DNA浓度倒是也能做PCR
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4楼2012-11-27 14:35:09
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