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lxh502976898

金虫 (小有名气)

[交流] 亲和层析 已有4人参与

如何提高亲和柱子的吸附 我想提高一下带组氨酸标签的目的蛋白的吸附
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1楼 2012-11-26 14:44:04
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lxh502976898

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-27 07:40:14
上样品前最好用binding buffer, wash buffer, elute buffer先上一下柱子，这样可以减少柱子的非特异性吸附，防止做完实验后很多东西还挂在柱子上。样品中加入低浓度咪唑（10-15mM）也可以减少非特异性吸附。如果样品 ...

我的目的蛋白现在20mM咪唑的结合液洗杂蛋白时，目的蛋白也洗来了，10mM能全部挂上柱，但是在7万（目的蛋白10000）那有杂带，如何让我的蛋白和柱子结合牢一点，超过20mM也不会不我的蛋白洗下来，洗脱时可以分阶段，在几个低阶段把杂蛋白先洗下来，高咪唑才把我的蛋白洗下来。
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8楼2012-11-27 11:07:40
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dshlove

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
降低杂蛋白的含量就行了，哈哈哈
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2楼2012-11-26 15:35:05
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lxh502976898

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-11-26 15:35:05
降低杂蛋白的含量就行了，哈哈哈

不懂 滚一边去 上亲和柱子 就是为了除杂蛋白 我说的是提高目的蛋白的吸附 降低杂蛋白的挂柱吸附
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3楼2012-11-26 16:32:04
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxh502976898 at 2012-11-26 16:32:04
不懂 滚一边去 上亲和柱子 就是为了除杂蛋白 我说的是提高目的蛋白的吸附 降低杂蛋白的挂柱吸附...

你怎么骂人呢？
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4楼2012-11-26 17:04:16
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