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芥末猫

银虫 (小有名气)

[求助] 表达载体构建 碱基突变 缺失 原因

最近做表达载体构建,总是出现碱基缺失和突变,而且总有突变成终止密码子的情况,请教各位前辈,这到底是怎么回事啊???? 望不吝赐教
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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突变成终止密码子的概率挺大的……
问题肯定是出在PCR,假如你用的胶回收的话还有可能是紫外照太久了……
要么还是用高保真酶吧,你这出现概率挺大的话说明你的片段不怎么短
8楼2012-11-26 08:15:36
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 芥末猫 at 2012-11-26 08:54:09
突变是因为紫外照射?? 控制在多长时间以内会比较安全呢...

我的意思是你如果是切胶回收的话,不是得在紫外光照射下回收么……紫外线是有可能导致DNA损伤,然后转化进细胞之后突变的~
没有一个固定的时间,总之在你力所能及的范围内尽快把胶切完应该就没问题的
16楼2012-11-26 12:10:07
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