| 查看: 2140 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
关于脂肪氧合酶底物亚油酸的制备
|
||
|
我现在在做肉制品的脂肪氧合酶 我的方法是 底物液准备:140mg亚油酸溶于5ml含有180ul的吐温20(Twen20)脱氧重蒸水中，该溶液用2N的NaOH调节pH在9.0到亚油酸完全溶解并且pH保持稳定。然后用脱氧重蒸水定容到50ml。 活力测定:200μl亚油酸钠底物与2.9ml pH为5.5的柠檬酸缓冲溶液混合，于20℃水浴中使其温度快速均匀，待其在234nm处的吸光值稳定后，加入0.lml酶液，迅速混合均匀于20℃、234nm处测其l min内吸光度的增加量。1个酶活力单位表示为每分钟每克蛋白质吸光度增加1。 求各位高手指点下，我的亚油酸买回来时液体的，我怎么取1400MG呢？ 我的底物定容后PH为什么在11左右，我怎么调回到9.0 呢？ 最后酶活的计算方法。 请大家指点下脱氧重蒸水的制备方法 |
回复此楼» 猜你喜欢
国自然和省自然祈祷
已经有52人回复
-
祈福今年面上得中
已经有14人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有155人回复
-
国社科又开始会评了，不知道这次命运如何
已经有14人回复
-
基金评审意见有问题
已经有5人回复
-
根癌农杆菌A136
已经有1人回复
-
🔥颠覆认知｜缺镁，可能悄悄偷走你的好心情
已经有0人回复
-
安徽省基金今年为什么开始的这么晚，本子什么时候送审，各位大神有了解的吗
已经有3人回复
-
Invitation to Explore China's Qiming Talent Program
已经有2人回复
-
中国启明计划// China's Qiming Talent Program
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为什么脂肪酶催化底物油反应时要加水？
已经有4人回复
- 脂肪氧化酶酶活测定实验中 底物的制备
已经有11人回复
- 【求助】你所知道的以脂肪酸或者脂质为底物的酶有哪些
已经有4人回复
7楼2017-09-29 09:46:40
shiliujuan
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 937.8
- 散金: 711
- 红花: 6
- 帖子: 147
- 在线: 254.8小时
- 虫号: 2059559
- 注册: 2012-10-14
- 性别: MM
- 专业: 食品科学基础
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
我做与大豆LOX相关的实验，我的亚油酸也是液体，但是方法里面取的就是mL。或许你可以查下亚油酸的密度，计算下需要的体积。 底物最后pH不是9，可能是NaOH加得太多，调pH用盐酸。 为什么你的酶活定义里面有蛋白质？我的酶活单位定义是30℃、pH9.0下以亚油酸为底物的3mL反应体系在234nm处每分钟增加0.001吸光度为一个单位，实验时取了1.5mL底物，所以计算公式是：吸光度增加值X1000X2X酶的稀释倍数/（反应时间X酶的体积），得出酶活是u/mL表示。我的底物和你的配置方法不同，所以我的公式仅供参考。 我的实验没有用脱氧水，所以结果会不准确。但是据说制备有点麻烦。 希望对你有所帮助。 我也有个疑问，你的亚油酸加的量挺多的，你买的是什么样的亚油酸，纯度多少？99%的亚油酸还是很贵的，纯度低了又怕影响实验结果。有问题可以一起讨论。 |
2楼2012-11-25 11:07:08
3楼2012-11-25 16:06:52
shiliujuan
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 937.8
- 散金: 711
- 红花: 6
- 帖子: 147
- 在线: 254.8小时
- 虫号: 2059559
- 注册: 2012-10-14
- 性别: MM
- 专业: 食品科学基础
4楼2012-11-25 16:55:25
50