| 查看: 1579 | 回复: 6 | |||
[求助]
关于脂肪氧合酶底物亚油酸的制备
|
|
我现在在做肉制品的脂肪氧合酶 我的方法是 底物液准备:140mg亚油酸溶于5ml含有180ul的吐温20(Twen20)脱氧重蒸水中，该溶液用2N的NaOH调节pH在9.0到亚油酸完全溶解并且pH保持稳定。然后用脱氧重蒸水定容到50ml。 活力测定:200μl亚油酸钠底物与2.9ml pH为5.5的柠檬酸缓冲溶液混合，于20℃水浴中使其温度快速均匀，待其在234nm处的吸光值稳定后，加入0.lml酶液，迅速混合均匀于20℃、234nm处测其l min内吸光度的增加量。1个酶活力单位表示为每分钟每克蛋白质吸光度增加1。 求各位高手指点下，我的亚油酸买回来时液体的，我怎么取1400MG呢？ 我的底物定容后PH为什么在11左右，我怎么调回到9.0 呢？ 最后酶活的计算方法。 请大家指点下脱氧重蒸水的制备方法 |
回复此楼» 猜你喜欢
0955求调剂
已经有1人回复
-
0832食品调剂推荐
已经有0人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有115人回复
-
食品调剂-总分291-有中核论文导师一作、本人二作-一志愿南昌大学学硕-介绍详细
已经有12人回复
-
法国里尔大学_INRAE 2026招收食品方向CSC博士生
已经有0人回复
-
331求调剂，一志愿合工大食品工程（086003）
已经有2人回复
-
303分一志愿江南大学发酵工程学硕本科参加竞赛有实验室经历有酒厂质检员工作经历
已经有5人回复
-
331食品工程求调剂
已经有1人回复
-
一志愿福建农林大学 09 食品与营养 初试323
已经有0人回复
-
08600生物与医药调剂，其他方向也可以
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为什么脂肪酶催化底物油反应时要加水？
已经有4人回复
- 脂肪氧化酶酶活测定实验中 底物的制备
已经有11人回复
- 【求助】你所知道的以脂肪酸或者脂质为底物的酶有哪些
已经有4人回复
shiliujuan
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 937.8
- 散金: 711
- 红花: 6
- 帖子: 147
- 在线: 254.8小时
- 虫号: 2059559
- 注册: 2012-10-14
- 性别: MM
- 专业: 食品科学基础
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
我做与大豆LOX相关的实验，我的亚油酸也是液体，但是方法里面取的就是mL。或许你可以查下亚油酸的密度，计算下需要的体积。 底物最后pH不是9，可能是NaOH加得太多，调pH用盐酸。 为什么你的酶活定义里面有蛋白质？我的酶活单位定义是30℃、pH9.0下以亚油酸为底物的3mL反应体系在234nm处每分钟增加0.001吸光度为一个单位，实验时取了1.5mL底物，所以计算公式是：吸光度增加值X1000X2X酶的稀释倍数/（反应时间X酶的体积），得出酶活是u/mL表示。我的底物和你的配置方法不同，所以我的公式仅供参考。 我的实验没有用脱氧水，所以结果会不准确。但是据说制备有点麻烦。 希望对你有所帮助。 我也有个疑问，你的亚油酸加的量挺多的，你买的是什么样的亚油酸，纯度多少？99%的亚油酸还是很贵的，纯度低了又怕影响实验结果。有问题可以一起讨论。 |
2楼2012-11-25 11:07:08
3楼2012-11-25 16:06:52
shiliujuan
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 937.8
- 散金: 711
- 红花: 6
- 帖子: 147
- 在线: 254.8小时
- 虫号: 2059559
- 注册: 2012-10-14
- 性别: MM
- 专业: 食品科学基础
4楼2012-11-25 16:55:25
lihaitao321
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 5095.4
- 红花: 5
- 帖子: 1375
- 在线: 224.3小时
- 虫号: 2047631
- 注册: 2012-10-07
- 性别: GG
- 专业: 分析仪器与试剂
5楼2014-07-26 10:39:01
|
我也做Lox，现在也遇见了问题，用氢氧化钠调底物ph时溶液老是不能澄清，好不容易澄清啦！ph又超过了9，用盐酸调回9，溶液又会混浊，不知道怎么回事？还有就是看文献都是用硼酸盐缓冲液，我用pbs可以吗？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2017-09-05 16:57:01
7楼2017-09-29 09:46:40
