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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

[求助] 为何CTAB法提取的DNA总是断裂? 已有1人参与

最近一直提取的植物总DNA总是断裂,使用的是自己配制的溶液,用改良的CTAB法,提取过程已经很小心了,没有剧烈震荡,可是总是提到断裂的DNA 是什么原因呢?下图是我提的DNA 跑的0.8%琼脂糖凝胶电泳!急希望各位虫虫帮忙解答!

IMG_20121123_103631.jpg
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haha
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
23楼: Originally posted by 下雨的傍晚 at 2012-11-28 15:59:45
用异丙醇及无水乙醇沉淀时能看到明显沉淀,用RNA酶消解后就看不到沉淀了,是怎么回事啊?我沉淀的方法是,风干后的DNA加0.5ml(0.5ulRNA酶)的TE溶解,55度放置1h,加入等体积的氯仿/异戊醇抽提1次,12000r/min,10min ...

那你提完之后看呢,有没有条带?应该不会没有条带的
25楼2012-11-28 18:04:05
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shuishui007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
??是DNA断裂,是????大,RNA没消化,太多了。上???是DNA,下???分??????的2-3???带是RNA,用RNase消化一下就??会有了。???外,DNA沉淀???,4000-6000rpm离心??????。
2楼2012-11-24 20:48:19
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shuishui007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不是DNA断裂,是RNA没消化。上面的一条带是DNA,下面2-3条带是RNA,RNase消化一下就没有了。另外DNA沉淀后用4000-6000rpm离心就可以了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2012-11-24 20:52:44
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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by shuishui007 at 2012-11-24 20:52:44
不是DNA断裂,是RNA没消化。上面的一条带是DNA,下面2-3条带是RNA,RNase消化一下就没有了。另外DNA沉淀后用4000-6000rpm离心就可以了。

谢谢,那我加RNA酶是一下!
haha
4楼2012-11-25 14:12:31
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