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原位杂交,问题重重,求助!
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[交流]
原位杂交,问题重重,求助!
大家好,本人最近在做原位杂交,遇到了很多困难和问题,求助:
1.新配好的预杂交液加在探针里面后,起了很多小颗粒沉淀。。。。
2.组织样本根本一点都不显色!
另外,我的抗体和显色液都是罗氏的,只不过是前年买的,是11年12月到期,但是从来没有开封过,老板说没问题,可以用!
做了两次都这样,不知道问题何在?
我的预杂交液配方:
去离子甲酰胺 5ml
20× SSC 2.5ml
加温至50℃ ,加入硫酸葡聚糖 1g
聚合物溶解后,加入50× Denhardt 1mL
10%SDS 500μl
10mg/ml变性鲱鱼精子DNA 100μl
消毒三蒸水 400μl
时间紧急,请各位指导一下!不胜感激!
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