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dugujian2012

捐助贵宾 (小有名气)

[求助] 7S和11S蛋白的提取 已有1人参与

按照优化的Nagano 法提取7S和11S蛋白,为什么提取的11S蛋白比7S的少,并且最后一步沉淀(7S)离心后,不溶解,调PH也不行。那位高人给指点一下吧,谢谢!
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不知道
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wuxiao549

禁虫 (著名写手)

hsd3521: 应助指数+1 2013-01-31 08:01:13
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3楼2013-01-26 15:40:05
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dugujian2012

捐助贵宾 (小有名气)

用大豆分离蛋白作为原料按照优化的Nagano法提取7S和11S蛋白,为什么提取不出来?
不知道
2楼2012-11-23 10:31:36
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七彩翼

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuxiao549 at 2013-01-26 15:40:05
不知道你现在问题解决了没?
1、你最后一步蛋白质沉淀后不溶解,是不是蛋白质已经完全变性了?
2、你的原料(大豆分离蛋白)是哪来的?自己用低温脱脂豆粕提的还是直接买的?买的那种商业大豆分离蛋白在加工过程中 ...

你好,请教一下,提取11S 7S后一定要回调pH吗?,是把调完后沉淀溶解液拿去冻干吗?谢谢!
4楼2014-02-23 10:08:35
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wuxiao549

禁虫 (著名写手)

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5楼2014-02-23 11:54:49
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七彩翼

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wuxiao549 at 2014-02-23 11:54:49
1、如果不回调的话,冻干以后就不溶于水了,因为你蛋白的pH值在等电点附近
2、是的...

嗯,谢谢,还想问一下,1、用蒸馏水洗涤吗?如果洗的话,很多沉淀都溶解了,离心时就流失了。2、用蒸馏水和NaOH回调ph大约要几倍体积,是完全成溶液吗?
6楼2014-02-24 12:31:44
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wuxiao549

禁虫 (著名写手)

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7楼2014-02-24 23:09:35
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七彩翼

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wuxiao549 at 2014-02-24 23:09:35
1、我沉淀是用离心分离的,取出来时一块一块的,就用蒸馏水稍微冲了一下,不洗涤问题不大,洗多了蛋白都跑了。
2、几倍体积我不太清楚,我是用NaOH调的pH,完全变成溶液,水的话体积肯定增加很多的,然后透析除盐 ...

谢谢啦!那请问不进行透析,对后续做电泳有影响吗?
8楼2014-02-25 15:24:22
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wuxiao549

禁虫 (著名写手)

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9楼2014-02-25 22:35:36
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七彩翼

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by wuxiao549 at 2014-02-25 22:35:36
这个我不是太清楚啊,最好还是透析吧。你自己再好好查一下看看。...

非常感谢你!
10楼2014-02-26 13:19:51
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