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zdx516

铁虫 (小有名气)

[求助] 求助：RNAi可以来对细菌做基因敲除吗？我看到报道都是植物、动物

求助：RNAi可以来对细菌做基因敲除吗？我看到报道都是植物、动物
由于我菌株的特别，不能用同源重组的方法进行基因敲除，因为该菌生物量很小，在固体培养基上肉眼看不见菌落，打算用RNAi的方法，初次接触，不了解，查了一下，一些文章都是用RNAi对植物动物进行的基因敲除。
                              谢谢
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1楼 2012-11-20 16:44:26
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scelab
难
2楼2012-11-20 20:32:28
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zdx516: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-11-28 18:33:30
RNAi不能敲除基因，只是使目的基因沉默，抑制表达。如果用RNAi，目的基因还是在宿主里的，RNAi抑制程度和突变体的稳定性也不完全相同，要随时监测mRNA水平。RNAi可以用于原核生物，只是RNAi的机制和真核生物有些不一样。
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3楼2012-11-21 07:34:02
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sadc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
zdx516: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-11-28 18:33:00
反义RNA在原核微生物中一样可以抑制基因表达，但不是基因敲除。
另外用反义RNA，同样存在转化的问题。菌落小不是问题，只要能看见就可以了。
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4楼2012-11-26 02:01:58
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
zdx516: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-28 18:33:12
能做啊~只是机理不太一样而已。主要还是得选好一个合适的RNA去干扰，以及带上一个合适的诱导型或者组成型启动子
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5楼2012-11-26 08:07:55
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hhw19890207

新虫 (初入文坛)
各位大侠，本人最近要做金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌）操纵子上游一个功能基因的敲除，因为之前从没有涉猎过，求指教，非常感谢！
P.S.之前看的文献敲除的基因有同源重组和Red重组技术以及RNA介导方法，不知道是否我的菌株适合那一种方法？
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期望共同进步
6楼2013-10-24 17:07:37
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