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hraikeyan

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[求助] 构建基因文库（sauA酶切后胶回收效率低该怎么办

各位大侠：最近在构建基因文库，遇到一些问题,请各位帮忙解决一下啦
我用sauA不完全酶切基因组，得到合适范围的基因片段（2-6kb），再用试剂盒进行胶回收，发现胶回收效率很低，（附件是我回收前后基因片段大小的对比），上样量一样，但是回收后条带明显变得暗很多。
还有个问题：我回收的是2-6kb的片段，可回收后发现片段明显变小了，这是怎么回事？我该怎么调整我的实验方案？拜托各位了!
除了试剂盒回收，还有其他高效的回收方法吗？

回收前后对比（左：回收后；右：回收前）.jpg

[ Last edited by hraikeyan on 2012-11-16 at 23:08 ]

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nothing isimpossible

1楼 2012-11-16 23:04:27

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hraikeyan

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引用回帖:

11楼: Originally posted by mqs123 at 2012-11-19 21:21:04
觉得你的基因组浓度有些低，先提高基因组的量，酶切后条带是分散的一大片，需要你你胶回收的时候多回收几管，一个柱子的洗脱液在洗下一管，我是6管胶回收的柱子，最终加了60UL的水，条带挺亮的。

你是用六个柱子回收胶的吗？一个柱子的洗脱液再洗下一个柱子？你不完全酶切总共切了多少ug的基因组，才够建库的？