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mqs123

金虫 (初入文坛)

觉得你的基因组浓度有些低,先提高基因组的量,酶切后条带是分散的一大片,需要你你胶回收的时候多回收几管,一个柱子的洗脱液在洗下一管,我是6管胶回收的柱子,最终加了60UL的水,条带挺亮的。
11楼2012-11-19 21:21:04
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hraikeyan

金虫 (小有名气)

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11楼: Originally posted by mqs123 at 2012-11-19 21:21:04
觉得你的基因组浓度有些低,先提高基因组的量,酶切后条带是分散的一大片,需要你你胶回收的时候多回收几管,一个柱子的洗脱液在洗下一管,我是6管胶回收的柱子,最终加了60UL的水,条带挺亮的。

你是用六个柱子回收胶的吗?一个柱子的洗脱液再洗下一个柱子?你不完全酶切总共切了多少ug的基因组,才够建库的?
nothing isimpossible
12楼2012-11-20 12:07:09
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hraikeyan

金虫 (小有名气)

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11楼: Originally posted by mqs123 at 2012-11-19 21:21:04
觉得你的基因组浓度有些低,先提高基因组的量,酶切后条带是分散的一大片,需要你你胶回收的时候多回收几管,一个柱子的洗脱液在洗下一管,我是6管胶回收的柱子,最终加了60UL的水,条带挺亮的。

135916906,这是我们几个刚开始建库的童鞋建的一个群,想邀请您加入,能帮我们解决一些问题吗?
nothing isimpossible
13楼2012-11-20 12:08:52
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mqs123

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

4ug/UL,酶切体系是:
30UL: 加入DNA10ul,三管一组,我一般做2-3组.
14楼2012-11-22 13:57:46
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hraikeyan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by mqs123 at 2012-11-19 21:21:04
觉得你的基因组浓度有些低,先提高基因组的量,酶切后条带是分散的一大片,需要你你胶回收的时候多回收几管,一个柱子的洗脱液在洗下一管,我是6管胶回收的柱子,最终加了60UL的水,条带挺亮的。

请问你跑胶时用的配胶板长度是6cm的,还是12cm的?我觉得我用6cm的跑不开(如上图),12cm的跑的太开了,以至于最后回收的时胶的体积过大,回收效率不高啊!
nothing isimpossible
15楼2012-12-05 22:02:13
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