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小可123

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎样选择已知基因的miRNA?

各位前辈,我想设计一条mirna同时让两个基因都沉默,是不是要针对两个基因的同源区域进行设计?要找两条序列的同源区域,是不是用nucleotide blast,然后选择Align two or more sequences输入两天序列比对即可?还有,我用wmd3设计了已知基因的miRNA,可是软件给了很多结果,如何从众多结果中挑选较好的mirna序列呢?因为是新手,所以又好的问题,希望各位能帮忙,在此先谢谢啦~~~
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小可123 at 2012-11-18 20:49:58
呜呜呜,太感谢你了,我的邮箱nanamalina@163.com...

好的,我给你发一下
jiayoubashaonian
5楼2012-11-19 10:54:30
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小可123: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-18 20:50:14
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-11-19 13:56:46
amiRNA设计是该技术的第一步,也是成功与否的关键步骤(Warthmann等,2008)。一个优化的amiRNA在序列上通常要满足以下条件:(1)第1位碱基通常是U;(2)第10位碱基通常是A,这是由RISC复合体中核酸内切酶内在作用特点决定的(Schwab等,2006);(3)5′端保持不稳定性,即5′端AU含量最好要高一些。研究发现小RNA 5′端的不稳定性是小RNA高效作用的主要原因,同时只有这样的小干扰RNA才能有效地整合入RISC;(4)第2位与第12位碱基之间最多只能有1个错配碱基,该错配碱基不能位于切割位点上,即不要出现在第10和第11位碱基上(Lin等,2009);(5)在第13位和第21位碱基之间最多只能出现4个错配碱基,并且不要连续出现2个或2个以上的错配碱基(Ameres等,2007;Schwab等,2005);(6)尽可能在全基因组范围内考虑amiRNA和mRNA的关系,减少amiRNA作用的非特异性;(7)针对外源病毒基因的amiRNA与病毒基因序列可以完全互补配对,能有效提高沉默效应。这些设计原则被总结并公布在网站(http://wmd.weigelworld.org/cgi-bin/mirnatools.pl)上
jiayoubashaonian
2楼2012-11-16 07:49:39
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

如果方便的话,我这里有些资料,可以发给您,祝顺利!
jiayoubashaonian
3楼2012-11-16 07:50:32
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小可123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-11-16 07:50:32
如果方便的话,我这里有些资料,可以发给您,祝顺利!

呜呜呜,太感谢你了,我的邮箱nanamalina@163.com
4楼2012-11-18 20:49:58
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