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ddf273634096

新虫 (小有名气)

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专业: 作物栽培与耕作学

[求助] 跑荧光定量PCR，目的基因都是NA，内参基因均跑出来了，请问是怎么回事？

测的是水稻分蘖芽中的OSTB1，MOC1这2个目的基因，内参选的Actin。用的百乐的荧光定量机子。
第一次跑的OSTB1基因，CT值在28左右，同一重复内部三管的重复性还不错。
后面跑MOC1基因时，CT值是NA？请问是怎么回事？
引物均是来自文献。

OSTB1.jpg

MOC1.jpg

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1楼 2012-11-10 17:20:06

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新虫 (小有名气)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by mamadexiao at 2012-11-11 11:17:16
本身表达量太低。。。
还有，你确定下你的这个组织中确实表达这个基因吧。。。建议先做个普通PCR,看看表达不吧。。。
都不表达了，你这个差异也是没意义的了。或者，你可以找个表达这个基因的组织，做个对照，看看 ...

恩，看别人文献都是取分蘖芽测的这几个基因，应该要表达的。请问会不会是退货温度的问题，我都设计的55度。
引物都加了，我分别测了MOC1，D3，D10,D27，不可能四次都没加引物。
另外，我引物放的时间有点长了，差不多四个月了，请问会不会是引物失活的原因？