24小时热门版块排行榜    

查看: 2942  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ddf273634096

新虫 (小有名气)

[求助] 跑荧光定量PCR,目的基因都是NA,内参基因均跑出来了,请问是怎么回事?

测的是水稻分蘖芽中的OSTB1,MOC1这2个目的基因,内参选的Actin。用的百乐的荧光定量机子。
第一次跑的OSTB1基因,CT值在28左右,同一重复内部三管的重复性还不错。
后面跑MOC1基因时,CT值是NA?请问是怎么回事?
引物均是来自文献。

OSTB1.jpg



MOC1.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是MOC1在你测的组织的生长条件下丰度低,可以尝试适当增加做qPCR时cDNA的用量。实在不行的话可以在做反转录的时候加入3’引物。
3楼2012-11-11 02:12:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by ddf273634096 at 2012-11-12 08:44:09
恩,我等回去试试,另外请问可能是退火温度的原因吗?...

你做qPCR前没有做一下引物的退火温度梯度吗?
10楼2012-11-13 07:51:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ddf273634096 的主题更新
信息提示
请填处理意见