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894598330

新虫 (初入文坛)

[求助] MRS培养基活化乳酸菌不长 是什么原因

MRS培养基:
蛋白胨10 g,牛肉膏10 g,酵母膏5 g,柠檬酸氢二铵2.O g,葡萄糖20 g,磷酸氢二钾2 g,乙酸钠5 g,硫酸镁O.5 g,硫酸锰O.25 g,吐温80 1 mL,琼脂,15g, 加蒸馏水至1000 mL,pH 6.4
挑取 冷冻保藏的菌划线于斜面,28摄氏度的恒温培养箱中培养,一直好多天都没染菌,也没长菌,这是什么原因呢?我做的才是第一次活化

我也用另一种培养基(蛋白胨5g,酵母膏2g,葡萄糖10 g,琼脂,20g, 磷酸二氢钾2g,加蒸馏水至1000 mL,pH 7.0 ),同时做了37摄氏度和28摄氏度的,也都不长
然后我接种了别人的菌种(非冷冻保藏的,已经转接了好几次的菌) , 她说是 土生拉乌尔菌  长的挺好
请问我的乳酸菌不长会是什么原因??????求助
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

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5楼: Originally posted by 894598330 at 2012-11-08 19:50:19
菌种保存了还不到两个月了  也就一个来月 要用哪类特殊培养基呀 愁死我了...

先莫愁

乳酸菌要复状的话,一般是在乳中培养一代,然后再活化并做其它用途。你配:10%脱脂乳,1%酵母粉。121℃7min后急冷。然后正常接菌培养
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8楼2012-11-09 08:30:27
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 17:26:59
看看是不是你斜面保存的时间太长了,一般不要超地过3个月
时间太长可能菌种死亡了,或是活性已经太低,用普通的培养基已经无法将其活化起来,需要用特殊一点的活化方法
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2楼2012-11-08 08:37:55
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894598330

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-08 08:37:55
看看是不是你斜面保存的时间太长了,一般不要超地过3个月
时间太长可能菌种死亡了,或是活性已经太低,用普通的培养基已经无法将其活化起来,需要用特殊一点的活化方法

菌种保存了还不到两个月了  也就一个来月 要用哪类特殊培养基呀 愁死我了
5楼2012-11-08 19:50:19
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chaocheng11

新虫 (初入文坛)

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★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 17:27:07
894598330: 金币+1, 有帮助 2012-11-14 09:31:25
并不是每个乳酸菌都会在MRS培养基生长的,在生长不旺盛的时候,可以用脱脂乳培养基,先活化。
3楼2012-11-08 10:31:35
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竹子小小

木虫 (小有名气)

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不会是接种环太烫烧死了吧。用液体看能摇起来不
4楼2012-11-08 12:56:59
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lilinlin123

木虫 (小有名气)

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我也正在分离乳酸菌 前面也遇到你那样的问题 后来我就-80冷冻保存了 没出过问题
6楼2012-11-08 21:01:12
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894598330

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lilinlin123 at 2012-11-08 21:01:12
我也正在分离乳酸菌 前面也遇到你那样的问题 后来我就-80冷冻保存了 没出过问题

我的菌是在4摄氏度保藏的 它就老不出来 我们实验室也没有-80那么低的温度
7楼2012-11-08 22:20:02
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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)

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8楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-09 08:30:27
先莫愁

乳酸菌要复状的话,一般是在乳中培养一代,然后再活化并做其它用途。你配:10%脱脂乳,1%酵母粉。121℃7min后急冷。然后正常接菌培养...

你好,我也遇到类似问题,请问脱脂乳121℃ 7min就能灭菌了吗?另外脱脂乳培养后怎么接种呢?是转入固体还是液体培养基?直接将脱脂乳菌液混匀后用接种环接种吗?谢谢!
9楼2013-03-06 09:31:26
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

121℃ 7min就能灭菌,放心,没问题
另外脱脂乳培养后会凝乳,然后按体积比1%-2%椄入液体培养基培养
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10楼2013-03-06 09:38:12
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