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牛圈圈

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于SDS法提取乳酸菌总DNA~1%琼脂糖凝胶电泳~~ 已有1人参与

我用的是SDS法提取乳酸菌总DNA~方法如下:

1). 将100ml培养液转移至离心管中,12000rpm离心5min,弃上清。
2).用6mlTE悬浮菌体,加入6ml裂解液、10ml氯仿,摇匀。
3).60℃温浴40min(每隔一段时间摇匀一次)
4).5000rpm离心10min,取上清至新管中
5). 用等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提,12000rpm离心10分钟,将上清液移至干净离心管。
6). 用等体积异戊醇:氯仿(1:24)抽提,12000rpm离心10分钟,取上清液移至干净管中。
7). 加入1/10体积3M NaAc,在加入等体积异丙醇,-20℃放置30min.
8). 用小勾子勾出沉淀,用70%的乙醇洗涤沉淀。
9). 在60℃烘箱中烘20-30min,加入1-2mlTE或者超纯水溶解DNA。

勾出来很多絮状的物质见图一
可是溶解以后跑电泳为啥是这样的???DNA的条带颜色很淡。最主要的是第五个孔点的是1ul的样,而第三、四个孔和第五个孔是一样的样品,但是上样量是10ul,可是主条带还没第五个孔亮。。。
真的没思路了。。。。求大神们帮帮小女吧。。。

提出来的絮状



1%琼脂糖电泳~
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hqxhss

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你解决了吗。我也遇到了这样的问题
3楼2016-09-12 10:11:37
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chocolater

新虫 (初入文坛)

怎么感觉条带bp数很小?你有点maker吗?
2楼2016-08-27 09:22:14
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