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关于SDS法提取乳酸菌总DNA~1%琼脂糖凝胶电泳~~ 已有1人参与
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我用的是SDS法提取乳酸菌总DNA~方法如下： 1). 将100ml培养液转移至离心管中，12000rpm  离心5min，弃上清。2).用6mlTE悬浮菌体，加入6ml裂解液、10ml氯仿，摇匀。 3).60℃温浴40min（每隔一段时间摇匀一次） 4).5000rpm离心10min，取上清至新管中 5）. 用等体积酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）抽提，12000rpm离心10分钟，将上清液移至干净离心管。 6）. 用等体积异戊醇：氯仿（1：24）抽提，12000rpm离心10分钟，取上清液移至干净管中。 7）. 加入1/10体积3M NaAc，在加入等体积异丙醇，-20℃放置30min. 8）. 用小勾子勾出沉淀，用70%的乙醇洗涤沉淀。 9）. 在60℃烘箱中烘20-30min，加入1-2mlTE或者超纯水溶解DNA。 勾出来很多絮状的物质见图一 可是溶解以后跑电泳为啥是这样的？？？DNA的条带颜色很淡。最主要的是第五个孔点的是1ul的样，而第三、四个孔和第五个孔是一样的样品，但是上样量是10ul，可是主条带还没第五个孔亮。。。 真的没思路了。。。。求大神们帮帮小女吧。。。  提出来的絮状  1%琼脂糖电泳~ |
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3楼2016-09-12 10:11:37