应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于转化
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1088  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

[交流] 关于转化 已有2人参与

最近做转化，第一次和第二次由于载体的问题，没有成功，在换了载体之后，蓝白斑筛选平板上居然全是白色的菌落，而且pcr鉴定后居然连接成功，真的是很诡异的事情啊，就算连接效率高，也不能全部是白斑吧，各位大神有没有相同经历啊
回复此楼

» 猜你喜欢
让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
1楼 2012-10-31 22:07:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-02 06:59:32
你是指什么条件不对，非特异性严重又指什么呢？是说菌落PCR吗？...

就是pcr摸索不对条件啊，非特异性的条带很多，今天一个同学做那个pcr，居然什么都没有，难道我上次做的是幻觉？、？
赞一下 回复此楼
让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
8楼2012-11-02 20:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-02 13:47:16
当使用双酶切做连接时，如果酶切比较完全，而且连接体系载体：目的片段比例合适，阳性克隆可能接近100%。所以我只有在自连概率大的时候才做蓝白斑筛选。
赞一下 回复此楼
2楼2012-11-01 06:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-01 06:59:27
当使用双酶切做连接时，如果酶切比较完全，而且连接体系载体：目的片段比例合适，阳性克隆可能接近100%。所以我只有在自连概率大的时候才做蓝白斑筛选。

问题是只是单酶切啊，纠结
赞一下 回复此楼
让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
3楼2012-11-01 10:55:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-02 13:47:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-01 10:55:08
问题是只是单酶切啊，纠结...

你是否把载体做了去磷酸化处理？如果这样载体不能自连，必需和插入片段连。要么就是你的目的片段也有抗性筛选基因，也可能使筛选板上基本是阳性克隆。当然，如果你的x-gal失效了的话另当别论。
赞一下 回复此楼
4楼2012-11-01 14:04:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学321分求调剂 +9 三dd. 2026-03-30 10/500 2026-03-30 18:24 by 544594351
[考研] 328求调剂 +8 嗯滴的基本都 2026-03-27 8/400 2026-03-30 17:20 by Wang200018
[考研] 311求调剂 +5 蓝月亮亮 2026-03-30 5/250 2026-03-30 16:36 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +13 032500 2026-03-25 13/650 2026-03-30 16:25 by wangjy2002
[考研] 0703化学 +14 妮妮ninicgb 2026-03-27 14/700 2026-03-30 12:46 by fangnagu
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +13 丹青奶盖 2026-03-26 15/750 2026-03-30 12:35 by fangnagu
[考研] 085602 化学工程专硕 340分求调剂 +4 qianbai11 2026-03-29 4/200 2026-03-30 11:34 by 唐沐儿
[考研] 318求调剂 +7 陈晨79 2026-03-30 7/350 2026-03-30 10:49 by 探123
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-26 7/350 2026-03-30 08:39 by 探123
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 085600，专业课化工原理，321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 0856，材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 机械学硕310分，数一英一，一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭