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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 抑菌试验（纸片扩散）可以这样做吗？
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seven9870

新虫 (小有名气)

[求助] 抑菌试验（纸片扩散）可以这样做吗？

前几天用滤纸片法做抑菌测试，用发酵上清液和发酵上清液的乙酸乙酯相分别试验，结果后者有个别出现了抑菌圈，而前者对6种靶标菌都没有抑菌圈出现，有的还在滤纸片上长出菌丝了。请问大家，是否用发酵液乙酸乙酯相做过抑菌试验，这么做有什么不对的地方吗？为什么会出现抑菌圈呢？
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1楼 2012-10-23 11:42:19
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huzhining99
2楼2012-10-23 12:14:13
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huzhining99
3楼2012-10-23 12:14:23
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纸鸢花

金虫 (正式写手)

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seven9870: 金币+2, ★有帮助 2012-10-28 16:20:12
我们研究的是放线菌，我们不要发酵液的上清液，我们要发酵后离心剩下的菌体，采用甲醇浸提，然后吸取甲醇浸提液进行抑菌试验
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每天动一动，收点金币就行了
4楼2012-10-23 12:39:15
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aloon111

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-23 17:08:55
seven9870: 金币+2, ★有帮助 2012-10-28 16:20:55
抑菌物质能用乙酸乙酯萃取出来，当然这部分就有抑菌圈了。但发酵上清液应该也有抑菌圈的。你确定乙酸乙酯挥发干净了？也有可能上清液里的其它成分影响了活性成分抑菌
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汇天下之贤
5楼2012-10-23 14:05:24
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sailor521

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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seven9870: 金币+2, ★有帮助 2012-10-28 16:21:23
应该有一个原来的培养液用乙酸乙酯抽提抽作对照比较能说明问题，个人感觉！
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别太放肆，没什么用！
6楼2012-10-23 21:43:09
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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seven9870: 金币+2, ★有帮助 2012-10-28 16:22:04
有可能浓度不太够吧，毕竟萃取的话也是一个浓缩的过程。楼主你换算一下萃取液和上清之间浓度能差多少，如果浓度差很多话有可能发酵上清里面浓度不够不足以出抑菌圈~
顺便提一句，滤纸上长出来的菌丝是你抗生素产生菌的菌丝还是测试菌的菌丝？有可能上清残留一点菌体在滤纸上长出来了~
当然楼主也可以考虑用牛津杯来做测活，牛津杯的载量比滤纸要大
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7楼2012-10-24 12:53:39
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swaucq

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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seven9870: 金币+2, ★有帮助 2012-10-28 16:22:39
发酵上清液含水相物质较多，而抑菌活性物质一般在有机相，所以用发酵上清液做活性效果不好，各种物质相互干扰，没活性，而且含水本身就容易染霉菌。一般用甲醇提取物作活性测试。
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不卑不亢
8楼2012-10-24 17:19:49
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